ГОСТ 31747—2012
9 Проведение испытания
1
Схема проведения испытания приведена в приложении А.
9.1 Метод выявления колиформных бактерий
9.1.1 Навеска и исходное разведение
Отбор навесок и приготовление исходного разведения — по ГОСТ 26669.
9.1.2 Инокуляция и инкубация
9.1.2.1 В зависимости от требуемых пределов выявления х см1жидкой пробы или х см3исходной
суспензии при использовании других продуктов переносят в пробирку, содержащую 10 см3обогати
тельной селективной среды двойной концентрации [см. таблицы 1а, 2а, За], когда 1 см3< х
й
10 см3,
или в пробирку, содержащую 10 см3обогатительной селективной среды нормальной концентрации
[см. таблицы 16.26, 36], если
хй
1 см3.
При испытании высококислотных продуктов для предотвращениярезкого сниженияpH (на 0.5
иболев) питательныхсредпосле внесения в нихпродукта или егоразведенияpH питательныхсред
доводят до допустимых значений с помощью сторилы ого раствора гидроокиси натрия, приготов
ленного по ГОСТ 10444.1. илиприприготовлении питательныхсредpH устанавливают выше задан
ного с учетом его последующего снижения при внесении продукта. Количество добавляемого
стерильного раствора гидроокиси натрия или величину, на которую необходимо увеличить pH при
приготовлении питательных сред, устанавливают опытным путем.
Допускается доводитьpH до нейтрального значения с помощью стерильногораствора гидро
окиси натрия в самом высококислотном продукте.
9.1.2.2 Пробирки с посевами всреду двойной концентрации (см. 9.1.2.1) инкубируют при темпера
туре (37 ± 1) °С в течение (24 ± 2) ч.
9.1.2.3 Пробирки с посевами в среду нормальной концентрации (см. 9.1.2.1) инкубируют при тем
пературе (37 • 1) °С втечение (24 ± 2) ч. Если нет образования газа или помутнения, затрудняющего вы
явление газа, продолжают инкубацию еще (24 ± 2) ч.
9.1.3 Подтверждение
9.1.3.1 Из пробирок (см. 9.1.2.2) после инкубации инокулируют петлей подтверждающую среду
нормальной концентрации (см. 6.1—6.4). Посевы инкубируют втермостате при температуре (37 ± 1) 9С в
течение (24 ± 2) ч. если нет образования газа, то продолжают наблюдение до (4812) ч.
В качестве арбитражной среды используют бриллиантовый зеленый лактозный желчный бульон.
9.1.3.2 Повторяют процедуру, описанную в 9.1.3.1, для пробирок после инкубации по 9.1.2.3, в ко
торых отмечено образование газа или помутнение, препятствующее выявлению образования газа, по
сле (24 ± 2) ч или после (48 i 2) ч инкубирования.
9.1.4 Оценка результатов
Возможные случаи оценки результатов приведены в приложении А.
Пробирки по 9.1.3.1 или 9.1.3.2. в которых отмечено образование газа после (24 ♦ 2) ч или после
(48 i 2) ч, считают положительными.
При выявлении колиформных бактерий отмечают присутствие их внавеске х гили х см3продукта.
9.2Метод НВЧ — определение количества колиформных бактерий
При определении количества колиформных бактерий по методу НВЧ высевают не менее трех по
следовательных навесок продукта и (или) его разведений, отличающихся по количеству продукта вних в
10 раз.
9.2.1 Навеска, исходная суспензия и разведения
Отбор навесок, приготовление исходного разведения и десятикратных разведений проводят
по ГОСТ 26669.
Готовят достаточное число разведений
по ГОСТ26669.
гарантируя, что все пробирки, соответству
ющие конечному разведению, покажут отрицательный результат.
9.2.2 Инокуляция и инкубация
9.2.2.1 Используют три пробирки для каждой навески продукта и (или) его разведения.
3.2.2.2 Стерильной пипеткой переносят в каждую из трех пробирок с одной из селективных обога
тительных сред двойной концентрации [см. таблицы 1а, 2а. За] 10 см3 пробы, если она жидкая, или 10
см3исходной суспензии в случае других продуктов.
Каждую навеску продукта в трехкратной повторности высевают в среду двойной концентрации в
пробирки размером 20 х 200 мм.
8