ГОСТ 31747—2012
Соотношение между количеством высеваемого продукта и питательной средой двойной кон
центрации 1:1.
9.2.2.3 Другой стерильной пипеткой переносят вкаждую из трех пробирок с одной из селективных
обогатительных сред нормальной концентрации [см. таблицы 16),
26).
36)] 1 см3 пробы, если продукт
жидкий, или 1 см3исходной суспензии в случае других продуктов.
Каждую навеску продукта и (или) его разведения в трехкратной повторности высевают в пробирки
размером 16 х 160 мм.
Соотношение между количеством высеваемого продукта или его
разведением
и питатвлыюй
средой 1:10.
9.2.2.4 Каждое последующее разведение высевают всоответствии с 9.2.2.3, используя новуюсте
рильную пипетку. Осторожно перемешивают инокулум и среду.
3.2.2.5 Пробирки с посевами в средудвойной концентрации (см. Э.2.2.2) инкубируют при темпера
туре (37
1
1) вС в течение (24 i 2) ч.
3.2.2.6 Пробирки с посевами в среду нормальной концентрации (см. 9.2.2.3 и Э.2.2.4) инкубируют
при температуре (37 ±. 1) вС в течение (24 ± 2) ч. Если нет образования газа и/или помутнения, препят
ствующего выявлению образования газа, продолжают инкубирование еще (24
± 2)
ч.
9.2.3 Подтверждение
9.2.3.1 Из каждой пробирки после инкубации по Э.2.2.5 инокулируют петлей подтверждающую
среду (6.16—6.46). Посевы инкубируют в термостате при температуре (37 ± 1) еС в течение (24 ± 2) ч.
Если нет образования газа и/или помутнения, то продолжают инкубирование еще (24
1
2) ч.
В качестве арбитражной среды используют бриллиантовый зеленый лактозный желчный бульон.
9.2.3.2 Повторяют процедуру, описанную в 9.2.3.1 для пробирок после инкубации по Э.2.2.6, пока
завших образование газа или помутнение после (24 ± 2) ч или после (48 ± 2) ч.
Допускаетсяне проводитьпересев нажидкую подтверждающую средупри явном газообразова
нии на жидких средах нормальной концентрации, считая при этом эти посевы положительными.
9.2.4
Оценка результатов
Возможные случаи оценки результантовприведены в приложении А.
Для каждой навески продукта и/или егоразведения подсчитывают число пробирок, вкоторыхобна
ружено образование газа (положительные пробирки) после (24 ± 2) ч и (если использовали) после
(48 ± 2) ч.
9.2.5 Подсчет и выражение результатов
Подсчитывают наиболее вероятное число, исходя из числа положительных пробирок в каждой на
веске продукта и/или его разведении. По
ГОСТ26670
определяют НВЧ колиформных бактерий в 1 г или
1 см3продукта.
9.3 Метод определения количества колиформных бактерий — подсчет колоний
9.3.1 Навеска и исходное разведение
Отбор навесок и приготовление исходного разведения — по ГОСТ 26669.
9.3.2 Инокуляция и инкубация
9.3.2.1 Для посева жидкого продукта и/или каждого разведения используют две параллельные
чашки Петри. Переносят стерильной пипеткой 1 см3жидкого продукта или соответствующего разведе
ния в центр каждой чашки. При посеве жидкого продукта и/или каждого разведения в чашку Петри ис
пользуют отдельную стерильную пипетку.
9.3.2.2 В каждую чашку Петри (9.3.2.1) наливают около 15 см3одной из сред (6.5—6.7) температу
рой 44 °С—47 вС. Время, прошедшее между посевом продукта и/или его разведения вчашку Петри и за
ливкой среды, не должно превышать 15 мин.
Аккуратно перемешивают инокулят со средой и оставляют смесь для застывания, для этого чашки
Потри помещают на холодную горизонтальную поверхность.
В качестве арбитражной среды используют VRBL — агар.
Параллельно для контроля стерильности агаризованной среды встерильную чашку Петри налива
ют приблизительно 15 см3среды и инкубируют вместе с посевами.
9.3.2.3 После застывания среды в чашках Петри на ее поверхность наливают около 4 см3исполь
зованной агаризованной среды (6.5—6.7) температурой 44
СС
—47 °С для создания второго слоя. Добав
ленная среда должна затвердеть, как описано в 9.3.2.2.
9.3.2.4 При определении колиформных бактерий посевом на агаризованныв селективно-диаг
ностические среды (6.5—6.7) по 0.1или 0.2 см3навески продукта или его разведения наносят на по-
9