ГОСТ 31747—2012
10.2 Для дополнительного подтверждения принадлежности выросших бактерий к колифор-
мным бактериям отбирают не менее чем по пять типичных и атипичныхколоний из чашекПетри с
посевами по 9.3.3.
Атипичные колонии отбирают те. в которых подтверждено наличие колиформных бактерий
посевом в жидкую подтверждающую среду.
10.3 Каждую отобранную дляподтвержденияколониюпересеваютна поверююсть скошенного
питательного агара по 6.9 или 6.10. посевы тврмостатируют при температуре (37
±
1)°Св тече
ние (24 ± 3) ч.
Принадлежность к колиформным бактериям определяют по отношению к окраске по Гоаму. по
отсутствию оксидазы. по ферментациилактозы на среде Гисса.
10.3.1 Окраска по Граму
Приготовление мазков из культур, выросших на скошенной поверхности питательного агара,
и окраскуих по Гоаму. проводят по ГОСТ30425. Колиформныв бактерии являютсяграмотрицатель-
ными палочками.
Допускаетсяокраскупо Гоамузаменять тестом Гоегорсвна. дляэтого на предметном стекле
в калле 3 % водного раствора калия гидроокиси эмульгируют культуру микроорганишов. взятую из
колонии с плотной среды. Если через несколько секунд взвесь ослизняется иза петлой тянутся сли
зистые нити, то этоуказывает на принадлежность испытуемой культуры к грамотрицатольному
виду. Уграмположительных бактерий слизистых нитей не образуется.
10.3.2 Определение отсутствия оксидазы
Определение отсутствия оксидазы проводят по ГОСТ 29184.
Для определения оксидазыдопускаетсяиспользование дисковирастворовпромышленногопро
изводства. зарегистрированныхна территории государства, принявшего стандарт. Для контроля
качества дисков и растворов используют музейные оксидазоположительные и оксидазоотрица-
тельныв культуры.
10.3.3 Определение ферментации лактозы
Для определения ферментациилактозы испытуемуюкультурувысевают уколом в средуГисса
с лактозой.
Посевы тормостатируют при температуре (371 1) °С в течение (24
±
3) ч.
Колиформныв бактерии ферментируют лактозу с образованием кислоты (цвет среды меня
ется) и газа.
10.4По результатам дополнительного подтверждения к колиформным бактериям относят
аэробные и факультативно-анаэробные не образующие спор грамотрицатольные оксидазоотрица-
тельныв палочки, сбраживающие лактозу с образованием кислоты и газа.
11 Протокол испытания
Результаты оценивают по каждой пробе отдельно.
Протокол испытания должен включать:
- всю информацию, необходимую для полной идентификации продукта;
- используемый метод в соответствии с настоящим стандартом;
- все детали испытания, не установленные этим стандартом;
- полученный(е) результат(ы).
и