ГОСТ 31694-2012
6.5 Построение градуировочной характеристики
6.5.1 Градуировочную кривую строят при помощи матричной градуировки.
Для этого проводят обработку «чистых» проб, приготовленных и проанализиро
ванных ранее в соответствии с требованиями раздела 7, не содержащих тетра-
циклинов более 1 мкг/кг для каждого из антибиотиков, в зависимости от типа ис
следуемой матрицы. На стадии перерастворения перед введением в хроматограф
8 мерную пробирку вместимостью 5
c m
j ,
содержащую исследуемую «чистую»
пробу, добавляют градуировочный раствор тетрациклинов по 6.3.5.1 с таким рас
четом, чтобы окончательные массовые концентрации находились в пределах от
1 до 1000 нг/см3. Затем добавляют 50
m m j
раствора внутреннего стандарта по
6.3.5.2 и необходимое количество мобильной фазы А по 6.3.4.1. доводя объем
до 1 см3.
6.5.2 Для получения градуировочных данных используют не менее четырех
уровней концентраций матричных градуировочных растворов.
6.5.3 При построении градуировочной зависимости для количественного оп
ределения тетрациклинов анализируют матричные градуировочные растворы
различных уровней концентраций в условиях, описанных в 6.2 и 6.4. Затем строят
графики зависимости массовой концентрации антибиотика тетрациклиновой груп
пыот отношения площади хроматографического пика антибиотика тетрацикли
новой группы к площади пика внутреннего стандарта для каждого фрагментного
иона четырех антибиотиков тетрациклиновой группы. Образец графика приведен
в приложении Б.
Построение графиков может проводиться при помощи программы обработ
ки данных ВЭЖХ-МС/МС или при помощи программы Excel (Microsoft Office).
6.5.4 Расчетные концентрации для обоих фрагментных ионов каждого ан
тибиотика тетрациклиновой группы должны совпадать в пределах 20 %.
Градуировочная зависимость считается приемлемой, если рассчитанное
значение квадрата коэффициента корреляции для градуировочной кривой каждо
го фрагментного иона каждого антибиотика тетрациклиновой группы не менее 0.98.
6.6 Подготовка лабораторной посуды и реактивов
6.6.1Мойку и сушку посуды следует проводить в отдельном помещении,
оборудованном приточно-вытяжной вентиляцией. Не допускается проведение
подготовки посуды в данном помещении для других видов анализов. Для сушки
лабораторной посуды и подготовки реактивов необходимо использовать отдель
ные сушильные шкафы.
9