ГОСТ Р 51196—2010
5.10 Глутамат-пируват-трансаминаза (ГПТ), из свиного сердца
20 мг суспензии ГПТ растворяют в 1,0 см3раствора сульфата аммония (см. 5.5). pH полученной
суспензии должен быть около 7. Удельная активность суспензии глутамат-пируват-трансаминазы дол
жна быть не менее 1600 едУсм3при 25 °С. Если это не так. приготовляют другую суспензию ГПТ.
Добавляют 1,0 см3раствора сульфата аммония (см. 5.5)к 1см3суспензии с 20 мг ГПТ и перемеши
вают. Центрифугируют полученные 2,0 см3 суспензии, содержащей 10 мг ГПТ/см3 при радиальном уско
рении 4000 g в течение 10 мин. Переносят 1,0 см3 прозрачной надосадочной жидкости, удаляют
оставшиеся раствор и осадок.
Суспензия D-ЛДГ стабильна в течение 12 мес при хранении в холодильнике при температуре от
0 °С до 5 °С.
Во время использования раствора L-ЛДГ согласно разделу 8 емкость с ферментом охлаждают и
выдерживают в ледяной бане.
5.11 Раствор L-лактата лития
50 мг L-лактата лития (C3H50 3Li) растворяют в воде. Разбавляют водой до 500 см3и перемеши
вают.
5.12 Раствор D-лактата лития
50 мг D-лактата лития (C3Hs0 3Li)растворяют в воде. Разбавляют водой до 500 см3 и перемеши
вают.
6 Оборудование и вспомогательные материалы
Используют обычное лабораторное оборудование и. в частности, перечисленное ниже.
6.1 Аналитические весы, имеющие точность взвешивания 1 мг, с ценой деления 0.1 мг.
6.2 Стеклянный химический стакан вместимостью 50 см3.
6.3 Мерный цилиндр вместимостью 50 см3.
6.4 Мерные колбы с одной меткой вместимостью 10 см3.
6.5 Пипетки вместимостью 0.02; 0.05; 0.2; 1.0 и 2,0 см3.
6.6 Градуированные пипетки вместимостью 5 и 10 см3, с делениями 0,1 см3.
6.7 Стеклянный фильтр диаметром около 7 см.
6.8 Фильтровальная бумага со средним размером пор. диаметром около 15 см, не содержащая
молочной кислоты и лактатов.
6.9 Стеклянная палочка.
6.10 Пластиковые шпатели, пригодные для перемешивания смеси проба-фермент в спектромет
рической кювете.
6.11 Спектрофотометр или фотометр с шириной спектральной полосы пропускания не более
10 нм. относительной погрешностью измерений И % в интервале оптических плотностей от 0.000 до
2.000. пригодный для проведения измерений при 340 нм.
6.12 Кюветы для фотометрических измерений сдлиной оптического пути (шириной грани) 1см из
кварцевого стекла или полимерных материалов (полистирола или полиметакрилата), пригодные для
измерения оптической плотности при 340 нм.
6.13 Допускается использование других средств измерений с метрологическими характеристика
ми. материалов илабораторного оборудования с техническими характеристиками, не уступающими пе
речисленным выше.
7 Отбор проб и приготовление
7.1В лабораторию необходимо доставить представительную пробу. Проба не должна быть по
вреждена или модифицирована при транспортировании или хранении.
Отбор проб не является частью метода, устанавливаемого в настоящем стандарте.
Отбор проб — по ГОСТ Р 26809 и для экспортно-импортных операций — по [2].
Пробу хранят в условиях, в которых не допускается ее повреждение или изменение состава.
Пробудля испытаний переносят в емкость, имеющую вместимость примерно вдвое большую, чем
объем пробы, и снабженную герметичной крышкой. Емкость незамедлительно закрывают. Пробу тща
тельно перемешивают путем многократного встряхивания и переворачивания емкости.
з