ГОСТ РЕН 12469—2010
Приложение F
(обязательное)
Контроль эффективности защиты от перекрестных загрязнений в боксах класса II
F.1 Принцип
Способность боксов микробиологической безопасности по предотвращению перекрестных загрязнений оце
нивается уровнем загрязнения чашек с агаром, расположенных на рабочей поверхности бокса, при распылении
аэрозоля суспензии микробиологических спор внутри бокса.
П р и м е ч а н и е —
Л
иния, по которой ламинарный нисходящий поток раздваивается и где он частично на
правляется в переднюю приемную решетку, а частично в заднюю решетку, не всегда проходит по центру внутренней
боковой стенки. Поэтому эта линия разделения должна быть установлена экспериментально в целях правильного
расположения распылителя. Место расположения распылителя может быть легко установлено путем визуализации
потока дымом (см. (18]).
Введением цилиндра через рабочий проем имитируется присутствие руки оператора, приводящее к возму
щению потока воздуха, входящего в бокс.
Испытание проводится в заданной контрольной точке.
F.2 Реагенты
Споровая суспензия, состоящая из спор непатогенных бактерий, например Bacillus аиЫШзмаг. globtgli(ссылка
NTCN 10073) а стерильной дистиллированной воде.
Чашки Петри диаметром 90 мм. содержащие питательный агар или триптический соевый агар.
F.3 Оборудование
Распылитель, способный генерировать, как минимум. 10тспор/мин со скоростью распыления, соразмерной
скорости поступающего вбоксчерезрабочий проем воздуха, и использующийметодХино иСэто (см. (18]). Скорость
распыления недолжна превышать скорость поступающего в бокс через рабочий проем воздуха.
П р и м е ч а н и е — Рекомендуются распылители Коллисон (см. (20]).
F.4 Процесс
F.4.1 Откалибровать распылитель, как указано в С.4.2.
F.4.2 Взвесить распылитель, содержащий 55 мл суспензии спор ((5—8) ■104Bacillus sublilts слор/мл], и уста
новить его так. чтобы горизонтальная ось распылителя располагалась на расстоянии 75—125 мм над рабочей
поверхностью, задняя сторона распылителя была прижата к левой внутренней стенке в точке, где нисходящий
потоквоздухараздваивается (тестсдымом). Осьструи располагается параллельно рабочей поверхности инаправ
лена к противоположной боковой стенке.
F.4.3 Включить бокси оставить его работатьдо тех пор. пока не будутдостигнуты нормальные рабочие усло
вия. т. е. минимум в течение 30 миндо начала испытания.
F.4.4 Установить открытые чашки Петри с агаром на рабочую поверхность. Установить два ряда контроль
ныхчашек вдоль центральной линии под выпускным отверстием распылителя. Установитьодин ряд чашек так. что бы
их центры находились на линии, идущей от передней стенки к задней на расстоянии 355 мм от боковой стенки,
которая подвергается испытанию. Установить минимум ещеодин ряд чашек за рядом, расположенным на расстоя
нии 355 мм. если возможно, установить два ряда чашек.
F.4.5 Включить в работу распылитель. Через 5 мин выключить распылитель, но работу бокса продолжать в
течение 15 мин. Взвесить распылитель.
F.4.6 Бокс должен работать во время установки крышек на открытые чашки с агаром. Инкубировать чашки
при 37 аС ипроверить их через24—28 ч. Если результатбудетотрицательным, топродолжить инкубирование и про
верить через 44—48 ч.
F.4.7 Повторить процедуру, описанную в F.4.3— F.4.6. установив распылитель управой внутренней стенки.
F.4.8 Испытания выполнить трижды с левой и правой стороны бокса.
F.4.9 Чашки с агаром, расположенные на расстоянии 355 мм от боковой стенки, будут содержать КОЕ
B.subUlls и могут быть использованы в качестве контрольных.
F.5 Подсчет и оформление результатов
Подсчитать ивыразить результат в количестве распыленных спор N. какописано в С.2.4.
Подсчитатьобщее количество КОЕ. обнаруженных на чашкахс агаром, расположенных на расстоянии, боль
шем чем 355 мм.
F.6 Отчет об испытании
Включить результат испытания и ссыпку на используемый метод (например, приложение F
ГОСТ РЕН 12469—2010) в документацию, указанную в разделе 9.
21