ГОСТ РЕН 12469—2010
Приложение Е
(обязательное)
Контроль эффективности защиты продукта в боксах класса II
Е.1 Принцип
Способность бокса по защите продукта проверяется путем определения уровня загрязнения чашек с пита
тельными средами, расположенными на рабочей поверхности бокса, с помощью аэрозоля суспензии споровых
культур, распыляемой снаружи бокса.
Введением цилиндра через рабочий проем имитируется присутствие руки оператора, приводящее к возму
щению потока воздуха, входящего в бокс.
Испытание проводится в заданной контрольной точке.
Е.2 Реагенты
Суспензия из спор непатогенных бактерий, например Bacillus subtIUs var. globlgll (ссылка NTCN 10073). в сте
рильной дистиллированной воде.
Чашки Петри диаметром 90 мм. содержащие питательный агар или триптический соевый агар.
Е.З Оборудование
Распылитель, способный генерировать, как минимум, Ю7спор/мин со скоростью распыления, соразмерной
скорости поступающего в боксчерез рабочийпроем воздуха,и использующий методХино иСэто(см. [18)). Скорость
распыления не должна превышать скорость поступающего в бокс через рабочий проем воздуха.
П р и м е ч а н и е — Можно рекомендовать распылители Коллисон (см. (20]).
Металлический цилиндрдиаметром 60—65 мм с гладкой поверхностью и закрытый с одного торца, располо
женный на регулируемой подставке.
Е.4 Процесс
Откалибровать распылитель, как указано в С.4.2.
Установить на рабочую поверхность бокса открытые чашки сагаром, а цилиндр в середине ее. Расположить
ось горизонтальной струи распылителя,содержащего 55 мл суспензии спор((5—8 )1 06Bacillus subtitls/un]. на уров
не верхнего края рабочего проема и вцентре междудвумя стенками бокса. Отверстие распылителярасположитьна
расстоянии 100 мм с наружной стороны проема. Ось струи располагается параллельно рабочей поверхности и
направлена в сторону открытого рабочего проема бокса.
Установить цилиндр внешним диаметром 65 мм в центре бокса таким образом, чтобы один торец упирался а
заднюю стенку бокса, а другой выступал на расстояние около 150 мм в комнату через рабочий проем бокса, ось
цилиндра должна быть расположена на высоте 70 мм над рабочей поверхностью бокса.
Установить чашку сагаром под центр цилиндра и закрепить ее на расстоянии 10 мм выше или ниже передней
всасывающей решетки для уменьшения препятствия воздушному потоку.
Включитьбокс и оставитьего работать, пока не будутдостигнуты нормальные рабочие условия,т. е. минимум
в течение 30 мин до начала испытания.
Взвесить распылитель и включить его в работу на 5 мин. После 5-минутной работы распылителя чашки с ага
ром закрыть крышками и взвесить распылитель снова.
Испытания повторить трижды.
Инкубировать чашки при 37 аС и проверить их затем через 24—28 ч. Если результат будет отрицательным,
продолжить инкубирование и проверить снова через 44—48 ч.
Контрольныечашкидолжны бытье положительным результатом. Результат считается положительным, если
чашка содержит более 300 КОЕ Bacillus subbtls.
Е.5 Подсчет и оформление результатов
Подсчитать и выразить результат в количестве распыленных спор N. как описано в С.2.4.
Вычислить суммарное количество КОЕ. находящихся на поверхности агара на всех чашках.
Е.6 Отчетов испытании
Включить результат тестирования и ссылку на используемый метод (например, приложение Е
ГОСТ Р ЕН 12469—2010)в документацию, указанную в разделе 9.
20