ГОСТ Р 53184—2008
Экстракцию образца проводят в стеклянной колонке с внутренним диаметром 30 мм и высотой ра
бочей части 30 см, имеющей в своей нижней части впаянный стеклянный фильтр Шотта и снимающийся
тефлоновый кран. На стеклянный фильтр помещают слой кварцевой ваты СКВ иуплотняютее стеклян
ной палочкой. Помещают 1/3 массы образца в колонку; в следующую 1/3 массы сначала вносят 50 мкл
изотопно-меченого раствора суррогатного стандарта SIS-1. перемешивают стеклянной палочкой, а за
тем помещают в колонку; после этого в колонку переносят остаток пробы и уплотняют содержимое
колонки постукиванием.
Экстрагируют ПХДД/ДФ. пропуская через колонку с пробой 300 см3 смеси гексан-дихлорме-
тан (1:1) со скоростью 3—4 мл/мин. Вытекающий из колонки экстракт-элюат собирают в круглодонную
колбу вместимостью 500 см3.
Экстракт-элюат концентрируют на роторном испарителе при температуре 50 °С до объема около
50 см3. Взвешивают грушевидную колбу 100 см3 и количественно переносят в нее сконцентрированный
экстракт, обмывая стенки колбы смесью гексан-дихлорметан (1:1). Экстракт концентрируют на ротор
ном испарителе до объема около 1 см3, добавляют около 1 см3дихлорметана и очищают методом
колоночной хроматографии.
Пробу рыбьегожира массой 1грастворяют в 20 см3смеси гексан-дихлорметан (1:1) иочищают ме
тодом колоночной хроматографии.
7.2Очистка экстракта методом колоночной хроматографии
7.2.1 Отделение липидов и высокомолекулярных соединений методом гель-фильтрации
Из подготовленной колонки Bio-Beads SE-X3 сливают через тефлоновый кран растворитель и, не
допуская высыхания верхнего слоя, промывают колонку, пропуская последовательно 35 см3 смеси ме-
танол-дихлорметан (1:4) и 65 см3смеси гексан-дихлорметан (1:1). Смесь такого же состава, гексан-ди
хлорметан (1:1), используют в качестве элюента.
После окончания промывки сорбента под колонку ставят мерный цилиндр вместимостью 50 см3 и
вносят в колонку сконцентрированный экстракт. Стенки колбы из-под экстракта обмывают не менее
пяти раз элюентом и смывки также вносят в колонку.
Пропускают элюатсо скоростью 1мл/мин, регулируя скорость тефлоновым краном. После пропус
кания 50 см3элюата (фракция FI) заменяют цилиндр и отбирают целевую фракцию FII. Когда объем це
левой фракции достигнет 50 см3, цилиндр с собранной фракцией FII извлекают из-под колонки.
Переносят фракцию FII вгрушевидную колбу и концентрируют на роторном испарителедо объема
- 1 см3и далее очищают на колонке с активированным и модифицированным силикагелем.
7.2.2 Очистка на колонке с силикагелем
Помещают в стеклянную колонку с внутренним диаметром 8 мм и длиной рабочей части 200 мм, с
резервуаром для элюата в верхней части слой кварцевой ваты заполняют в следующем порядке:
-1 см3 Si02aicr;
-1 см3 SiO./NaOH;
-1 см3ЭЮ2акт;
- 3 см3 Si02/H2S04;
-1 см3 Si02aKT;
- слой безводного Na2S04 на 1.0—1,5 см по высоте колонки.
Каждый вносимый слой уплотняют постукиванием.
Для смачивания сорбентов через колонку пропускают 10 см3гексана. Под колонку подставляют
чистую грушевидную колбу вместимостью 50 см3для сбора элюата. Затем вносят сконцентрированную
фракцию F1I, собранную с колонки Bio-Beads SE-X3. Элюируют аналиты 50 см3гексана. Стенки колбы
обмывают гексаном не менее пяти раз. смывки вносят в колонку последовательно. Элюат концентриру ют
на роторном испарителе до объема около 1 см3.
7.2.3 Очистка на активированном оксиде алюминия
Используют колонку с внутренним диаметром 6 мм идлиной рабочей части 150 мм, с резервуаром
для элюента в верхней части. На слой кварцевой ваты вносят 5 г сорбента. Пропускают через колонку
5 см3гексана. После прохождения гексана в колонку вносят сконцентрированный элюат, собранный по
сле колонки с силикагелем. Пропускают через колонку50 см3смеси гексан-дихлорметан (97:3), обмыва
ют стенки колбы элюатом не менее пяти раз. смывы вносят в колонку последовательно. Отобранную
фракцию утилизируют. Далее пропускают через колонку 50 см3смеси гексан-дихлорметан (40:60) (об.),
отбирая в чистую грушевидную колбу целевую фракцию Ф2. содержащую ПХДД/ДФ. Фракцию Ф2 кон
центрируют на роторном испарителе под вакуумом до объема около 0,5 см3.
12