ГОСТ Р 53400—2009
5.4.4 Полная среда
Перед составлением полной среды ее деаэрируют нагреванием и последующим быстрым охлаж
дением. В случае хранения среды во флаконах с завинчивающимися крышками крышки ослабляют пе
ред нагреванием и затем завинчивают перед охлаждением.
Затем к каждым 8 см3 основы среды (см. 5.4.1) добавляют 0.5 см3 раствора цитрата железа
(III) — аммония (см. 5.4.3) и 0,5 см3раствора двунатрия дисульфита (см. 5.4.2)
Среда используется в течение дня.
5.5 Подвижная нитратная среда (необязательно)
5.5.1 Состав в соответствии с таблицей 7.
Т а б л и ц е7
Состав
Знач-енис показателя
Ферментативный гидролизат казеина, г
5.0
Мясной экстракт, г
3.0
Галактоза,г
5.0
Глицерин, г
5.0
Азотнокислый калий (KN03). г
1.0
Динатрийфосфат (NaiHPO.»), г
2.5
Агар, г
1.0—5.0*
Диазорвзорин. г
0,001
Вода.
cmj
1000
* В зависимости от гелеобразующей способности агара.
5.5.2 Приготовление
Растворяют компоненты в воде, при необходимости раствор доводят до кипения. Устанавливают
уровень pH. чтобы после стерилизации он соответствовал (7.3 ± 0,2) при 25 °С.
Среду разливают в пробирки с выросшей разводкой-культурой по 10 см3истерилизуют вавтокла
ве 15 мин при 121 °С. Если среду не использовали в день приготовления, то ее хранят в холодильнике
при температуре (5 ± 3) X не более четырех недель после приготовления.
Непосредственно перед использованием подогревают в кипящей воде или на пару в течение
15 мин и затем быстро охлаждают до температуры разведения.
5.6 Нитратный реактив обнаружения (необязательно)
5.6.1 Раствор 5-амино-2-нафталинсульфокислоты (5-2-ANSA)
Растворяют 0,1 г 5-2-ANSA в 100 см3 15 %-ного (объемная доля) раствора уксусной кислоты. Фи
льтруют через бумажный фильтр.
Реактив хранят в хорошо закупоренном флаконе (предпочтительно с капельницей шаровидной
формы) в холодильнике при температуре (5
1
3) X .
5.6.2 Раствор сульфаниловой кислоты
Растворяют 0,4 г сульфаниловой кислоты в 100 см315 %-ного (объемная доля) раствора уксусной
кислоты. Фильтруют через бумажный фильтр.
Реактив хранят в хорошо закупоренном флаконе (предпочтительно с капельницей шаровидной
формы) в холодильнике при температуре (5 ± 3) X .
5.6.3 Приготовление полного реактива
Смешивают равные количества двух растворов (см. 5.6.1 и 5.6.2) непосредственно перед исполь
зованием. Неиспользованный реактив уничтожают.
5.7 Цинковая пыль (необязательно)
5.8 Лактозо-желатиновая среда
5.8.1 Состав в соответствии с таблицей 8.
5