ГОСТ Р 53400—2009
3 Термины и определения
В настоящем стандарте применяют следующие термины с соответствующими определени
ями:
3.1 Clostridium perfringens (С. perfringens): Бактерии, которые образуют типичные колонии (чер
ный осадок, вызванный разложением сульфита до сульфида, который окрашивает колонии в черный
цвет) в определенных селективных средах, и которые дают положительные реакции подтверждения,
если испытания проводят всоответствии с одним из двух методов, указанных в настоящем стандарте.
3.2 подсчет колоний С. perfringens: Определение количества способных к росту и подтвержден
ных бактерий Clostridium perfringens в см3или г образца при условии проведения испытания всоответ
ствии с методом, указанным в настоящем стандарте.
4 Сущность метода
4.1 Посев в чашки Петри определенного количества испытуемой пробы, если исходный продукт
жидкий, или установленного количества исходной суспензии.
Следующий посев вчашки Петри проводят ваналогичныхусловиях с использованием десятикрат
ного разведения испытуемой пробы или исходной суспензии.
Добавляют селективную среду (метод пластинчатого посева) и заливают посев сверху слоем той
же среды.
4.2 Анаэробная инкубация чашек при 37 °С в течение (20 ± 2) ч.
4.3 Подсчет типичных колоний.
4.4 Подтверждение ряда типичных колоний и определение количества колоний С. perfringens в г
или см3продукта.
5 Разведение, питательные среды и реактивы
В лабораторной практике используют ГОСТ Р ИСО 7218. ГОСТ Р 51448. ГОСТ Р ИСО 11133-1 и
ГОСТ Р ИСО 11133-2 для приготовления, производства, проверки и применения питательных сред.
5.1 Разведения
В общем случае разведения по ГОСТ Р ИСО 7218.
5.2 Сульфит-циклосериновый агар (SC)
5.2.1
Состав в соответствии с таблицей 1.
Т а б л и ц а
1
Состав
Значение показателя
Ферментативный белковый гидролизат, г
15,0
Ферментативный соевый гидролизат, г
5.0
Дрожжевой экстракт, г
5.0
Двунатрий дисульфит безводный (NaaS20 5). г
1.0
Железо (III) — аммония цитрат*, г
1.0
Агар, г
От 9.0 до 18.0**
Вода, см5
1000
* Реактив должен содержать не менее 15 % железа (массовая доля).
** В зависимости от гелеобраэующей способности агара.
5.2.1.1 Приготовление среды
Растворяют компоненты среды вгорячей воде и доводят до кипения. Устанавливают уровень pH.
чтобы после стерилизации он соответствовал (7,6 i 0,2) при 25 X .
Разливают среду во флаконы или бутылки соответствующей емкости.
2