ГОСТ Р 53400—2009
Дают застыть агару и инкубируют в анаэробных условиях при температуре 37 °С в течение
18— 24 ч. Потом выбирают из каждой чашки одну типичную и хорошо выделенную колонию.
При необходимости повторяют штрихование и посев на чашки Петри с основным агаром SC до по
лучения хорошо изолированных типичных колоний.
Подтверждают каждую колонию, как описано в 9.4.3.2, 9.4.3.3 и 9.4.3.4.
9.4.3.2 Инокуляция и исследование подвижной нитратной среды
Ииокулируют уколом каждую выделенную колонию (см. 9.3) втолько что деаэрированную подвиж
ную нитратную среду (см. 5.5).
Инкубируют в анаэробных условиях при 3 ®С в течение 24 ч. Исследуют пробирку с подвижной ни
тратной средой натип культуры полинии укола. Подвижность очевидна подиффузномураспределению
бактерий в среду от линии укола.
Проводят испытание на присутствие нитрита, добавляя с помощью градуированной пипетки
(см. 6.8) и резиновой колбы (см. 6.11) от 0.2 до 0.5 ш 3нитритного реактива обнаружения (см. 5.6) вкаж
дую пробирку с подвижной нитратной средой.
П р и м е ч а н и е — 8 целях безопасности проводят это испытание в вытяжном шкафу.
Образование красного цвета подтверждает восстановление нитрата до нитрита. Если красный
цвет не появляется втечение 15 мин. добавляют небольшое количество цинковой пыли (см. 5.7) идают
отстояться втечение 10 мин. Если красный цвет не появился после добавления цинковой пыли, восста
новления нитрата не произошло.
9.4.3.3 Инокуляция и исследование лактозо-желатиновой среды
Ииокулируют каждую выделенную колонию (см. 9.3) в только что деаэрированную лактозо-жела
тиновую среду (см. 5.8). Инкубируют в анаэробных условиях при 37 °С в течение 24 ч.
Исследуют пробирку с лактозо-желатиновой средой на присутствие газа ижелтого цвета (благода
ря образованию кислоты), указывающих на ферментацию лактозы. Охлаждают пробирки при 5 °С в те
чение 1ч и проверяют на сжижениежелатина. Если среда застыла, повторно инкубируют втечение еще
24 ч и снова проверяют на сжижение желатина.
9.4.3.4 Интерпретация
Бактерии, которые образуют черные колонии в среде SC. неподвижны, обычно восстанавливают
нитрат до нитрита, вырабатывают кислоту и газ из лактозы исжижают желатин за 48 ч. относятся кбак
териям С. perfringens. Культуры, которые дают слабую реакцию на нитрит (т. е. розового цвета), должны
быть ликвидированы, так как бактерии С. perfringens дают сильную и немедленную реакцию.
10 Обработка результатов
10.1 Метод расчета
Обработка результатов — по ГОСТ Р ИСО 7218.
10.2 Сходимость
10.2.1 Межлабораторные испытания
Данные о сходимости этого метода, описанные в настоящем стандарте, базируются на результа
тах межлабораторного испытания [1]. Детали этого межлабораторного испытания приведены в прило
жении А. Предельные значения повторяемости и воспроизводимости определялись на трех
видах продуктов, загрязненных на разных уровнях, и на контрольных материалах.
Значения, полученные на основе этого межлабораторного испытания, не могут применяться к
пределам концентраций и матрицам, отличным от приведенных здесь.
10.2.2 Повторяемость
Абсолютная разность между двумя отдельными (к>д,0-преобразованными) результатами испытаний
(число С. perfringens на гили см3) илиотношение большего кменьшему из двух результатов по нормальной
шкале, полученных при использовании одного и того же метода, на идентичном испытуемом материале,
одним и тем же оператором, использующим одно и то же оборудование, в течение короткого допустимого
промежутка времени, будет превышать предел повторяемости (г) не более чем в 5 % случаев.
В качестве общего показателя повторяемости (г) при испытании проб пищевых продуктов допуска
ется использовать следующие значения. Эти значения гявляются общими для всех матриц, рассматри
ваемых в процессе межлабораторного испытания:
8