ГОСТ Р 51600-2000
3.4.6.4Взамен контрольного разведения стрептомицина для проверки активности роста тест-
микроба могутбыть использованы диски со стрептомицином но 3.2.К).
3.4.7 Подготовка проб молока к анализу
Каждую пробу молока наливают по 5-10 см’ в чистую стерильную пробирку, прогревают в
течение (Ю±1) мин на водяной бане при температуре внутри пробирки (87±2) *С и охлаждают в
холодной воде до температуры 18 %—25 *С.
3.5 Проведение анализа
3.5.1Непосредственно перед исследованием молока на поверхности агаровой среды, разлитой в
чашки Петри по 3.4.4, пробойником или пробочным сверлом вырезают семь лунокдиаметром 10 мм.
Шесть лунок располагают по окружности чашки на равном расстоянии друг от друга и на расстоянии
Рисунок 1 — Схема
28 мм их центров от центра чашки. Седьмую лунку вырезают в центре чашки
(рисунок I) только в случае использования контрольного разведения анти
биотика.
3.5.2 В центральную лунку вносят 0.05 см5 контрольного разведения
антибиотика по 3.4.6.3 или в центре чашки на поверхность засеянной агаро
вой среды помешают диск со стрептомицином по 3.2.10. Влунки, располо
женные по окружности чашки, вносят по 0,05 см3исследуемых проб молока по
3.4.7.
3.5.3 Чашки Петри выдерживают при комнатной температуре в течение
(20±1) мин. затем их помешают втермостат крышками вверх и инкубируют
вырезаниялунок в
при температуре (55±1) *С в течение 4 ч. Чашки в термостате размешают в
агаровой среде
один ряд.
3.6 Обработка результатов
3.6.1 Результаты анализа оценивают непосредственно после инкубирования. Чашки просматрива
ют в проходящем свете от любого источника света.
Диаметры зон ингибиции роста тест-культуры, образуемых испытуемым образцом молока и
контрольным разведением антибиотика, измеряют линейкой или на аппарате Мнкрофот 5ПО-1 по
краям окружностей зон.
3.6.2 При отсутствии зон ингибиции контрольного разведения стрептомицина исследования по
вторяют с использованием вновь приготовленных засеянных чашек по 3.4.4 и контрольного разведе
ния антибиотика по 3.4.6.
3.6.3 При отсутствии антибиотиков в молоке диаметр зоны ингибиции должен быть менее 12 мм.
а при их наличии — 12 мм и более.
3.7 Метрологические характеристики
3.7.1 Наименьшие пределы определения антибиотиков предста&тены в таблице 1.
Та б л и ц а !
Ианмелование
антибиотика
Наименьший предел
определения. Ел/r (ны/г)"
Наименование
аитибишика
Наименьший предел
опреледения. Ед/г (мкг/t)1’
Бснзнлпенициллин
Стрептомицин
Тетрациклин
Окететраци кл ии
Хлортетрацшстин
0.005
0.5-1.0
0.1
0.1
0.05
’Эритромицин
Нсомииин
Мономииин
Лсвомнистин
Олеанломннин
0.05
0.25
0,25
2.5
2.5
11 1 мкг активного вещества равен 1 Ед активности.
4 Метод с индикатором бромкрезолпурпуром
4.1 Сущность метола
Метод основан на изменении окраски агаровой среды со спорами Вас. siearoihermophilus var.
calidolactis С953 от фиолетовой до желтой при отсутствии в исследуемом молоке антибиотиков и
других ингибирующих веществ и сохранении окраски — при их иатични.
4