ГОСТ Р ИСО 16000-3—2007
Раствордоводят ацетонитриломдометки5 мл. Колбу маркируюттакже, как ипробу. Аликвотувво
дят пипеткой в виалу с фторуглеродной мембраной. Аликвотуанализируютна содержаниеДНФГ-произ
водных карбонильных соединений методом ВЭЖХ. В качестве резервной возможен отбор второй
аликвоты, которуюхранятвхолодильникедо тех пор. пока небудетзавершенанализ иполучены пригод
ные результаты анализа первой аликвоты. При необходимости вторую аликвотуиспользуютдля прове
дения подтверждающего анализа.
При использовании для отбора проб стеклянных герметичных трубок, содержащих два слоя
сорбента с нанесенным ДНФГ. отламывают конец трубки, находящийся ближе ковторомуслою сорбен та
(выходной конец). Осторожноудаляютпружину ипробку изстекловаты, удерживающиеслой сорбен та.
Высыпают сорбентв чистуюстеклянную виалувместимостью4 мл сфторуглеродной мембраной или
крышкой. Виалу маркируют как резервную часть пробы. Осторожно вынимают вторую пробку изстекло
ваты и высыпают оставшийся сорбент в другую виалу вместимостью 4 мл. Виалу маркируют как основ
нуючастьпробы. В каждую виалупипеткойдобавляют3 мл ацетонитрила, закрываютвиалыиоставляют
на 30 мин. в течение которых виалы периодически встряхивают.
9.3.3 Градуировка ВЭЖХ
Градуировочные растворы готовят путем растворения ДНФГ-производного формальдегида
(см. 8.3) в ацетонитриле. Готовят индивидуальные исходные растворы массовой концентрацией
100 мг/л путем растворения 10 мг твердого производного в 100 мл подвижной фазы.
Подва раза проводятанализ каждогоградуировочного раствора (не менее пяти различных значе
ний массовой концентрации)исоставляют таблицу зависимости значений выходныхсигналов, соответ
ствующихплощадихроматографическихпиков, от введенноймассы соответствующеговещества (либо,
чтоболееудобно, от введенноймассыДНФГ-производногоформальдегидапри фиксированном объеме
петли (см. рисунки 4 и 5)). В процессе градуировки выполняют операции, соответствующие операциям,
проводимым при анализе пробы иустановленным в9.3.4. Воизбежание эффекта памяти хроматографа
анализ начинают с раствора с наименьшей массовой концентрацией. При использовании УФдетектора
или детектора наосноведиодной матрицыдолжна быть полученалинейная зависимостьвыходного сиг
налапри введениирастворовмассовойконцентрациейв диапазоне 0,05 — 20мкг/млпри вводимомобъ
еме 25 мкл. Полученные результаты используют для построения градуировочного графика
(см. рисунок 6). Градуировочную характеристику (зависимость выходного сигнала, соответствующего
площади пика, от значения массовой концентрации), полученную методом наименьших квадратов, счи
таютлинейной, есликоэффициенткорреляциинеменее0.999. Значениявремениудерживаниядля каж
дого аналита не должны отличаться друг от друга более чем на 2 %.
Послеустановлениялинейной градуировочнойхарактеристикипроводятежедневную проверкуее
стабильности с помощью градуировочного раствора со значением массовой концентрации, близким к
ожидаемому значению каждого компонента, но не менеечем в 10 разпревышающим предел обнаруже
ния. Определяемое при ежедневной проверке относительное изменение выходного сигнала недолжно
превышать10%дляаналитов массовой концентрациейнеменее 1мкг/мл и20% — дляаналитовмассо
вой концентрацией приблизительно 0,5 мкг/мл. Если наблюдается большее изменение, необходимо
провести повторную градуировкуили построение нового градуировочногографика наоснове свежепри
готовленных градуировочных растворов.
Условия хроматографирования,
колонка С-18 с обращенной фазой;
подвижная фаза: с объемным отношением 60 % ацстомигрил&/40 % воды:
детектор: УФ детектор, работающий на длине волны 360 нм
расход.
1
млУмкн,
время удерживания: для ДНФГ-производного формальдегида приблизительно
7 мин.
объем введенной пробы: 25 мкл.
Рисунок 4 — Пример хроматограммы ДНФГ-производного формальде
гида
I
-
1
-
1
--
1
--
1
0
------------
10
----
-----
2
---------------►
DВремя, мн
11