ГОСТ 11285-93 С. J3
ком воды. После полного растворения соли приготовленный раст
вор охлаждают до комнатной температуры. Срок хранения
раствора 1 мес.
3.7.2.2.Приготовл ениеи м м у н о г л о б у л и н о в ,сво
бодных от и н с у л и н а
К 58 см3 сыворотки крови прибавляют 42 см3 насыщенного
раствора аммония сернокислого и тщательно перемешивают, затем
центрифугируют при 3000 об/мин в течение 20 мин. Надосадочную
жидкость сливают, осадок растворяют в дистиллированной воде
в объеме, равном исходному объему сыворотки крови. Таким
образом проводят трехкратное переосаждение иммуноглобулинов
при вышеуказанных условиях.
Перед последним осаждением в пробирки вместимостью 5 см3
разливают по 2 см3 раствора иммуноглобулинов, а затем в каж
дую пробирку добавляют по 1,5 см3 насыщенного раствора ам
монии сернокислого. Содержимое пробирок тщательно перемеши
вают, центрифугируют при 3000 об/мин в течение 20 мин. Над
осадочную жидкость сливают, пробирки оставляют в наклонном
положении на фильтровальной бумаге для удаления остатков
раствора, после чего пробирки закрывают пробками.
Полученные таким образом иммуноглобулины хранят в моро
зильной камере бытового холодильника в течение 2 мсс. Перед
употреблением осадок размораживают и растворяют в 2 см3 дис
тиллированной воды.
3.7.2.3. Приготовлениефо с фа тн о г обуферас
pH (7,5±0,1)
В мерную колбу вместимостью 200 см3 вносят 81,0 см3 раст
вора натрия фосфорно-кислого двузамешенного концентрации
0,2 моль/дм3 н 19,0 ем3 раствора натрия фосфорнокислого одно-
замещенного концентрации 0,2 моль/дм3 Содержимое колбы
перемешивают и измеряют pH. Убедившись, что pH равно (7,5±
±0,1), объем раствора в колбе доводят дистиллированной водой до
метки. Раствор хранят при температуре 4°С.
3.7.2.4. Приготовл ение фо с фа тн о г обуферас pH
7,4. с о д е р ж а щ е г ои н г и б и то рпротеазо к о л и ч е
стве 300 и н г и б и р у ю щ и хединицв / см3
Приготовление раствора зависит от используемого для прове
дения аналаза ингибитора протеаз. При использовании ингиби
тора протеаз «Гордокс», содержащего 10000 ингибирующих еди
ниц в 1 см3, 1,5 см3 содержимого ампулы переносят в мерную
колбу вместимостью 50 см3, и доводят объем колбы фосфатным
буфером до 50 см3. Раствор должен быть свежеприготовленным и
охлажденным до температуры 4°С.