С. 12 ГОСТ 9958-81
4.4.3. Обработкарезультатов
Обнаружение полиморфных грамотрииательных палочек, образующих характерный рост на сре
дах в Н-форме (подвижные) и О-форме (неподвижные), ферментирующих глюкозу и мочевину,
неферментнрующих лактозу и маннит, указывает на наличие бактерий из рода протея.
4.5. О п р е д е л е н и ек о а г у л а з о п о л о ж и т е л ь н ы хс т а ф и л о к о к к о в
4.5.1. Сущность метода заключается вопределении морфологии, характера роста на питательных
средах и в способности отдельных стафилококков продуцировать лецитиназу и коагулировать нитрат
ную плазму крови кролика под воздействием фермента коагулазы.
(Измененная редакция, Изм. № 2).
4.5.2. Проведениеанализа
Из разведения анализируемой взвеси продукта (1:10) проводят посевы на молочно-солевой агар,
содержащий 65 г/дм’ хлористого натрия, для выявления пигмента или желточно-солевой агар, содер
жащий 65 г/дм’ хлористого натрия, для выявления лецитиназной активности.
Взвесь наносят на поверхность агара в количестве 0,2 см1 и равномерно растирают по всей повер
хности агаровой среды.
Посевы термостатыруют втечение 24 ч при температуре 37 *Си 24 ч выдерживают при комнатной
температуре.
На поверхности питательной среды колонии стафилококка имеют вид плоских или слегка вы
пуклых блестящих колоний с ровным краем. При этом на молочно-солевом агаре лучше выявляется
пигмент (эмалево-белый или золотистый), а на желточно-солевом агаре колонии стафилококков могут
образовывать «радужный венчик», что является одним из признаков их патогенности.
Из подозрительных колоний готовят препараты, которые окрашивают по Граму. При наличии
стафилококков в препарате обнаруживаются грамположительные мелкие кокки, располагающиеся
неправильными гроздья ми.
Для подтверждения признаков патогенности стафилококков ставят реакцию плазмокоагуляцни. В
прибор с 0,5 см’цитратной плазмы крови кролика, разведенной физиологическим раствором всоотно
шении 1:4. вносят петлю чистой суточной культуры стафилококка и ставят в термостат при температу ре
37 *С. Реакцию плазмокоагуляцни учитывают через 3—4 ч (не встряхивая пробирку) и оставляют в
термостате на сутки для окончательного учета через 24 ч.
Для постановки реакции плазмокоагуляцни можно использовать также сухую цитратиую плазму
крови кролика.
Реакцию считают положительной, если плазма коагулируется в сгусток.
(Измененная редакция, Изм. № 1, 2).
4.5.3. Обработкарезультатов
Для определения количества стафилококковучитывают колонии стафилококков, давшие поло
жительную реакцию плазмокоагуляцни.
При расчете на I гпродукта количество подсчитанных колоний умножают на степень разведения
и делят на количество посевного материала.
(Измененная редакция, Изм. № 1).
4.6. О п р е д е л е н и ес у л ь ф и т в о с с т а н а в л и в а ю щ и хк л о с т р и д и й
4.6.1. Сущность метода заключается вспецифическом росте сульфитвосстанапливаюших клострн-
дий в средах СЦС или Вильсон-Блера, на которых в результате восстановления сернистокислого на
трия всернокислый натрий происходит взаимодействие с хлористым железом иобразуется почернение
среды за счет сернистого железа.
4.6.2. Проведение анализа на сульфитциклосериновой среде(СЦС)
1см’ анализируемой взвеси (1:10 по п. 4.1.2) стерильной пипеткой вносят в пробирку с 9 см*
жидкой сульфитпиклосериновой среды, затем проводятпоследовательные пересевы на аналогичные
объемы среды, в результате чего получают возрастающие десятикратные разведения суспензии. Инку
бацию проводят при 46 ’С в течение 8—12 ч. При наличии роста сульфитвосстанавливаюшнх клостри-
дий образуется почернение среды.
4.6.1, 4.6.2. (Измененная редакция, Изм. .\е 1, 2).
4.6.2а. Проведениеанализа на среде Вильсон-Блера
В пробирки, содержащие по 9 см1расплавленной и охлажденной до температуры 45 "С среды
Вильсон-Блера. вносят стерильной пипеткой по 1 см’ десятикратных разведений (от 10 1до 10-’)
взвеси испытуемогопродукта. Посевной материал и среду тщательно перемешивают. Посевы помешают