С. 7 ГОСТ 18963-73
в холодильнике. Срок хранения растворов фуксина и розоловой кислоты — не
более одного месяца.
3.3.12. Приготовление желчно-.шктозного бульона с брилииштовым зеленым
10 г пептона, 10 г лактозы, 200 см3свежей фильтрованной желчи крупного
рогатого скота (или 20 г сухой обезвоженной желчи, растворенной в 200 см3
дистиллированной воды) растворяют при нагревании в 700
см5дистиллиро ванной волы, устанавливают pH (7,2—7,4), прибавляют
13.3 см3 1 %-ного водного раствора бриллиантового зеленого, доливают
дистиллированной водой до общего объема 1 дм3, фильтруют через ватный
фильтр, разливают по 5 см3 в пробирки с поплавками и стерилизуют при 112 "С
(0,49 10’ Па) 12 мин или три дня при 100 “С. Срок хранения —не более двух недель.
3.3.13. Приготовление борнокисюй буферной среды с лактозой
10 г пептона, 12,2 г калия фосфорнокислого двузамещенного (безводно
го), 4,1 г калия фосфорнокислого однозамешенного (безводного), 3,2 г бор
ной кислоты. 5 г лактозы растворяют в 1 дм3 дистиллированной воды,
разливают по 5 см3 впробиркиспоплавками,стерилизуютпри
112 "С (0,49 10’ Па) 12 мин. Срок хранения — не более двух недель.
3.3.12. 3.3.13. (Измененная редакция, Изм. № 2).
3.3.14. Приготовление реактивов для окраски по Гриму *
Карболовый раствор генциана фиолетового готовят следующим образом: I г
генциана фиолетового, 10 см3ректификованного этилового спирта, 5 г фенола
растирают в ступке, добавляя 100 см3дистиллированной воды.
Раствор Люголя готовят следующим образом: 1 г йода, 2 г йодистого калия
растворяют в 300 см3дистиллированной воды. Хранят во флаконе из темного
стекла.
Фуксин Циля готовят следующим образом: 1 г основного фуксина, 10 см3
ректификованного этилового спирта, 5 г фенола растирают в ступке, добавляя
100 см3дистиллированной воды.
Мазок на предметном стекле фиксируют трехкратным проведением через пламя
горелки. На препарат накладывают полоску фильтровальной бумаги и на нее нали
вают карболовый раствор генциана фиолетового на 0,5—1 мин. снимают бумагу,
наливают раствор Люголя на 0,5—1 мин, сливают раствор Люголя и стекло пропо
ласкивают в этиловом спирте в течение 0,5—1 мин, пока не перестанет отходить
краситель. Затем стекло тщательно промывают водой и докрашиваю! от I до 2 мин
фуксином Циля, разведенным 1:10 дистиллированной водой. После промывки и
просушивания препарата мазок микроскопируют.
Экспресс-метод окраски по Граму.
Приготовление реактива № I: 0.5 %-ныЙ спиртовой раствор кристалличес
кого фиолетового.
Приготовление реактива № 2: в 100см3ректификованного этилового спирта
растворяют 0,4 г йодистого калия, нагревают на водяной бане или оставляют
на сутки при комнатной температуре. Затем прибааляют 0,2 г кристаллического
йода и 0.1 г основного фуксина. Хранят во флаконе из темного стекла.
* Вместо карболового раствора генциана фиолетового и фуксина Циля допускается
использовать полоски фильтровальной бумаги, пропитанные соответствующими раство
рами и высушенные.
S74