ГОСТ Р 54655―2011
переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см
3
. Аналогично взвешивают и растворяют (2,85 ± 0,01) г
натрия фосфорнокислого 2-замещенного 2-водного по 6.2.16 и (9,00 ± 0,01)гнатрия хлористого по 6.2.18,
оба раствора количественно переносят в ту же мерную колбу. В ту же колбу добавляют 800 см
3
воды
для лабораторного анализа. Раствор тщательно перемешивают. Измеряют значение рН приготовлен-
ного раствора, которое должно составлять 7,4 ед. рН. В случае несоответствия значения рН довести
его до требуемой величины добавлением в мерную колбу 0,1 Н раствора гидроокиси натрия по 6.4.2.
Раствор доводят до метки водой по 6.2.20 и тщательно перемешивают.
Срок хранения буферного раствора при температуре 6 °С — 10 °С — не более одного года.
6.4.4 Приготовление моющего буферного раствора с твином 20
Фосфатный буферный раствор готовят по 6.4.3. Количественно переносят 500 см
3
в мерную колбу
вместимостью 1000 см
3
. Дополнительно в мерную колбу добавляют 0,5 см
3
твина 20 по 6.2.21, доводят
водой до метки и тщательно перемешивают.
Срок хранения раствора при температуре 6 °С — 10 °С — не более одного года.
6.4.5 Приготовление анализируемой пробы
Взвешивают (1,00 ± 0,001) г меда, подготовленного по разделу 5, в стеклянной виале вмести-
мостью 80 см
3
. Добавляют (49,00 ± 0,001) г фосфатного буфера 1 по 6.4.3 и тщательно завинчивают
крышку виалы. Виалу помещают в ультразвуковую ванну по 6.2.10 на 5 мин. Затем раствор интенсивно
перемешивают на шейкере по 6.2.7 в течение 2 мин. Перед анализом встряхивают пробы вверх-вниз.
6.4.6 Приготовление реагентов для анализа
Перед использованием набора довести температуру всех реагентов до комнатной в пределах
20 °С — 25 °С, а после использования охладить все оставшиеся реагенты до температуры 2 °С — 8 °С
в холодильных приборах по ГОСТ 16317.
В процессе выполнения анализа нельзя допускать высыхания лунок планшета. На всех стадиях
определения необходимо избегать воздействия прямого солнечного света.
Растворы антител, конъюгата, субстрата/хромогена, стоп-реагента, входящие в состав набора,
поставляются в готовом к употреблению виде. Перед употреблением достаточно вскрыть флакон.
6.4.7 Приготовление стандартных растворов
Подготовку стандартных растворов проводят только в одноразовых стеклянных виалах вместимо-
стью 1,5 см
3
.
Для подготовки к использованию стандартных растворов тетрациклина концентраты стандартных
растворов, входящих в состав набора, разбавляют буфером 1 (таблица 1). После разбавления необхо-
димо тщательно перемешать готовые растворы.
После каждой серии определений необходимо готовить свежие стандартные растворы.
Построение градуировочной кривой необходимо проводить для каждой серии определений.
Таблица 1 — Приготовление стандартных растворов тетрациклина
Номер концентрата стандарта
Объем концентрата, см
3
Объем буфера 1, см
3
Массовая концентрация
разбавленного стандарта, мкг/дм
3
1
0,050
0,450
0
2
0,050
0,450
0,150
3
0,050
0,450
0,450
4
0,050
0,450
1,350
5
0,050
0,450
4,050
6
0,050
0,450
12,150
5
6.4.8 Подготовка микротитровального планшета
Перед выполнением анализа из планшета необходимо извлечь необходимое количество стрипов.
Оставшиеся стрипы следует тщательно упаковать в фольгированный пакет вместе с осушителем, гер-
метично закрыть пакет и поместить на хранение при температуре 2 °С — 8 °С.
6.4.9 Процедура анализа
6.4.9.1 Вставляют в рамку планшета стрипы (лунки) в количестве, необходимом для выполнения
всех запланированных определений (стандартные растворы и образцы) в двух повторностях. Записы-
вают координаты лунок, предназначенных для стандартных растворов и подготовленных исследуемых
растворов.
Пример
формы
записи
координат
лунок
представлен
на
рисунке
1.