ГОСТ Р 54655―2011
R
Значения R и
представлены в таблицах 2 и 3.
6.6.3 При соблюдении всех регламентируемых методикой условий с доверительной вероятностью
Р = 0,95 не должны превышать значений, приведенных в таблицах 2 и 3.
6.6.4 Форма представления результата
Результат измерения в документах, предусматривающих его использование, представляют в виде
(М
ср
± ∆), мкг/кг, Р = 0,95,(4)
ср
где М— среднеарифметическое значение результатов двух параллельных определений остаточных
количеств антибиотиков группы тетрациклина, полученных в условиях повторяемости;
± ∆ — границы характеристик абсолютной погрешности результатов измерения массовой доли те-
трациклина, мкг/кг;
± ∆ = ±
∙ М
ср
/100, значение относительной погрешности ±
представлено в таблице 2.
7 Определение присутствия и массовой доли левомицетина
(хлорамфеникола, ХАФ)
7.1 Сущность метода
Базовым принципом для количественного определения ХАФ в меде является твердофазный конку-
рентный ИФА на планшетах из полистирола. Метод основан на конкуренции свободного ХАФ из анализи-
руемой пробы и коньюгата ХАФ за центры связывания специфичных к ХАФ антител, адсорбированных на
твердой фазе (лунке планшета). Весь несвязанный ферментный конъюгат удаляется на стадии промывки
лунок. Субстрат-хромогеновый раствор добавляют в лунки, связанный ферментный конъюгатвзаимодей-
ствует с хромогеном, образуются продукты голубого цвета. При добавлении стоп-реагента цвет раствора
меняется с голубого на желтый. Количество определяемого ХАФ, содержащегося в исследуемом образ-
це, обратно пропорционально регистрируемой оптической плотности продукта ферментативной реакции,
которую измеряют с помощью микропланшетного фотометра при длине волны 450 нм.
7.2 Средства измерений, вспомогательные устройства, посуда, материалы и реактивы — по 6.2 с
дополнением:
7.2.1 Многоканальный микроиспаритель или роторно-пленочный испаритель.
7.2.2 Стеклянные виалы вместимостью 1,5 см
3
с завинчивающимися крышками.
7.2.3 Колбы круглодонные для роторного испарителя вместимостью 10 см
3
или стеклянные про-
бирки вместимостью 10 см
3
для многоканального микроиспарителя.
7.2.4 Пробирки центрифужные с крышками вместимостью 15 см
3
однократного применения.
7.2.5 Набор реагентов для количественного определения хлорамфеникола.
7.2.6 Этилацетат, о. с. ч.
7.3 Характеристика набора для иммуноферментного определения ХАФ
Для иммуноферментного определения ХАФ применяют промышленно изготовленные наборы, ха-
рактеристики которых не ниже указанных в 7.3.1.
7.3.1 Состав набора
1)
7.3.1.1 Планшет микротитровальный на 96 лунок (12 стрипов по 8 лунок), сенсибилизированных
антителами против хлорамфеникола, — 1 шт.
7.3.1.2 Комплект стандартных водных растворов ХАФ со следующими массовыми концентрация-
ми: 0 (нулевой стандарт); 0,025; 0,050; 0,100; 0,250; 0,750 нг/см
3
по 1,3 см
3
— 6 флаконов.
7.3.1.3 Конъюгат ХАФ с пероксидазой (концентрат) — 0,7 см
3
.
7.3.1.4 Субстрат/хромогеновый раствор (розового цвета) — 10,0 см
3
.
7.3.1.5 Стоп-реагент, содержащий 1 Н серную кислоту, — 14,0 см
3
.
7.3.1.6 Буфер для разбавления конъюгата и растворения образцов — 100,0 см
3
.
7.3.1.7 Моющий буфер (соли) для приготовления 10 мМ фосфатного буфера (7,4 ед. рН), содер-
жащего 0,05 % твина 20.
8
1)
Отработка метрологических характеристик метода проводилась с применением наборов «Ридаскрин Хлор-
амфеникол». Данная информация приводится для удобства пользователей настоящего стандарта и не содержит
требований
применять
данный
набор.