ГОСТ 30087-93
флуориметрни одновременное пробой продукта анализируют раствор сравнения (50 мкдм3раствора
3,4-бензпирена концентрации I мкг/см3обрабатывают так. как указано в п. 3.3.1).
Полученные по п. 3.3.1 фракции полициклических ароматических углеводородов из пробы
продукта и пробы раствора сравнения растворяют в 0.5 см’ бензола и далее подвергают дополни
тельной очистке в тонком слое ацетилированиой целлюлозы.
Язя этого пластинку 20x20 см. подготовленную, как указано в п. 3.2, делят на два поля:
боковое —шириной 1,5—2 см и основное, проводя по слою сорбента скальпелем или тонким
шпателем разделяющую полосу. На основное поле сплошной полосой, отступив 2 см от нижнего
края пластинки и по 1 см с боковых краев, наносят раствор фракции полициклических аромати
ческих углеводородов. Раствор наносят с помощью гонко оттянутого стеклянного капилляра или
мнкрошприпа. размер пятен не должен превышать 5 мм. Язя количественного переноса вещества
его дважды смывают со стенок колбы небольшим количеством бензола (0.4—0.6 см1). На стартовую
линию бокового поля наносят в точку 5 мкдм3 раствора 3,4-бензпирена концентрации 1 мкг/см3.
После полного испарения растворителей со стартовой линии пластинки ее помещают в предвари
тельно насыщенную хроматографическую камеру и проводят элюирование в смеси этилового
спирта, ацетона и воды, взятых в объемном соотношении 60:25:15. Когда фронт растворителя
достигнет 2 см от верхнего края пластинки, ее вынимают из камеры, высушивают на воздухе
и проявляют хроматографическую зону 3.4-бензпирена под лампой ультрафиолетового облучателя.
Сорбент из зоны 3,4-бензпнрена с основного поля с помошью скальпеля или тонкого шпателя
соскабливают с пластинки и переносят на стеклянный фильтр, с которого вещество элюируют в
несколько приемов 50 см3бензола в колбу вместимостью 100 см3, далее растворитель упаривают до
небольшого объема, его остаток удаляют током воздуха и добавляют в колбу 1см3бензола.
На спектрофлуорнметре при длине волны возбуждающего света 388 нм в диапазоне 395—
440 нм при скорости сканирования 60 нм/мин записывают спектры флуоресценции пробы продукта
и пробы раствора сравнения (раствор 3.4-бензпирена, проведенный через все стадии анализа).
Спектры записывают в одном режиме усиления, регулируя шель и коэффициент усиления по
раствору сравнения так. чтобы сигнал составлял в максимуме при 406 нм 0,4—0,6 шкалы. При
высоких уровнях 3,4-бензпирена в продукте пробу следует растворить в большом объеме бензола и
вновь записать спектр в том же режиме усиления, что и стандарт. Для расчета используют
интенсивность флуоресценции раствора в максимуме с длиной волны 406 нм. На полученных
спектрограммах измеряют высоту спектральной линии 3,4-бензпнрена в максимуме при 406 нм.
Проводят два параллельных определения.
3.3.4 Обработка результатов
3.3.4.1О б р а б о т к ар е з у л ь т а т о впом е т о д ув н у т р е н н е г ос т а н
д а р т а
Содержание 3,4-бензпирена (А’,) в мнкрограммах на килограмм вычисляют по формулам:
А,
т,
/и,
(от, - от,) •1000
от
от3 S, ■К
s[’
от, S, К
S<’
где т —масса продукта, взятая для испытания, г;
от, —масса 3,4-бензпнрена в пробе продукта, мкг;
от^ —масса 3,4-бензпирена в пробе контрольного опыта, мкг;
от3 —масса бенз(в)хрнзена, введенная в пробу контрольного опыта и пробу продукта, мкг;
.V,. S2 —площади пиков 3,4-бензпирена на хроматограммах пробы контрольного опыта и пробы
продукта, см2;
S\, S. —площади пиков бенз(в)хризена на хроматограммах пробы контрольного опыта и пробы
продукта, см2;
К —калибровочный коэффициент;
1000 —коэффициент пересчета граммов в килограммы.
Результат округляют до второго десятичного знаю».
Из результатов двузе параллельных определений вычисляют среднее арифметическое значение
с тем же числом знаков после запятой и определяют расхождение между каждым результатом и
10S11