ГОСТ Р 59786—2021
4.3 Протокол тестирования производственных партий дегидратированного бульона
Мюллера-Хинтон
Процедуры подготовки исследований методом последовательных разведений приведены в
ИСО 20776-1. Выполнение этих процедур следует осуществлять со следующими ограничениями (по
правками). которые перечислены ниже.
a) Минимальная и максимальная концентрация каждого антимикробного препарата в каждом
планшете должна выходить за пределы допустимого диапазона значений для контрольных штаммов,
как минимум на два двукратных разведения с каждой стороны.
b
) Для каждой из комбинаций «микроорганизм-антимикробный препарат», перечисленных в 4.4,
необходимо провести тестирование одного микробного инокулюма как минимум трижды, в трех отдель
ных планшетах. Этот перечень комбинаций «микроорганизм-антимикробный препарат» представляет
минимальные требования для тестирования и включает антибактериальные препараты, использова
ние которых способно детектировать определенные проблемы со средой. Другие антимикробные пре
параты могут быть включены в исследование по усмотрению производителя и по мере необходимости
для проверки стабильности среды. Среда должна соответствовать требованиям, предъявляемым к ис
следованию выбранных антимикробных препаратов.
c) Подробная информация о контрольных штаммах приведена в ИСО 20776-1, CLSI [6] или
EUCAST (4]. Как минимум, за два дня до исследования размораживают все флаконы с необходимыми
культурами контрольных штаммов (см. 4.4). Инокулируют каждую культуру на чашку Петри с неселек
тивной питательной агаровой средой и инкубируют ее в течение 18—24 ч при температуре от 34
°С до 37 °С в обычной атмосфере согласно ИСО 20776-1. После инкубации проверяют чистоту
культуры. За день до определения чувствительности к антибиотикам контрольные штаммы снова
пересевают для получения свежих (суточных) колоний для приготовления инокулюма. Все
микроорганизмы должны быть пересеяны как минимум дважды из замороженного состояния перед
использованием для тести рования.
d) При использовании замороженных планшетов сантибиотиком, перед их использованием, план
шеты следует полностью разморозить при комнатной температуре (обычно это занимает от 1 до 2 ч).
Планшеты с антибиотиками должны использоваться в тот же день, когда они были разморожены.
e) Определение чувствительности к антибиотикам должно осуществляться в соответствии с
ИСО 20776-1. Инокулюм каждого контрольного штамма должен быть подготовлен путем приготовления
суспензии из одной колонии. Инокулированные планшеты с микроразведениями должны быть
инкуби рованы в течение 16—20 ч (24 ч — для оксациллина и Staphylococcus aureus), результаты
должны быть учтены в течение одного часа после извлечения планшетов из термостата.
0 Результаты оценки антибиотикочувствительности регистрируют и хранят в соответствии с по
рядком. используемым производителем в отношении внутреннего документооборота. Пример оценки
результатов чувствительности к антибиотикам приведен в приложении С.
4.4 Интерпретация результатов
Допустимые диапазоны МПК представлены в таблице 1 (см. [14] и [15]).
Допустимые диапазоны периодически пересматриваются и обновляются. В этой связи необхо
димо использовать пограничные значения последних версий EUCAST [14]. Необходимо проверять та
блицы на предмет возможных изменений. Альтернативные номера контрольных микроорганизмов из
различных коллекций культур приведены в приложении В.
Т а б л и ц а 1 — Диапазоны допустимых значений МПК. мг/дм3(мг/л), для контрольных штаммов
Референтный штамм
Аитимицюбныи препарат
Допустимый диапазон. мг/ды3(мг/п)
Pseudomonas aeruginosa
WDCM 00025
Ципрофлоксацин
0,25— 1
Гентамицин
0.5—2
Имипенем
1—4
Пилерацилпин-тазобактам
1/4—8/4
5