ГОСТ Р 59786—2021
среды (бульон Мюллера-Хинтон), приготовленные издегидратированного продукта, должны содержать
не более 25 мг/дм3(мг/л) общего кальция и 12.5 мг/дм3 (мг/л) общего магния. Производители могут от
дать предпочтение в пользу производства партий среды с установленными концентрациями катионов
или фактическими уровнями менее 20 мг/дм3 (мг/л) Са2* и 10 мг/дм3 (мг/л) Мд2*. В последнем случае на
маркировке указывают фактическое содержание катионов в партии бульона. При окончательном ис
следовании приготовленный бульон Мюллора-Хинтон должен содержать от 20 до 25 мг/дм3(мг/л) Са2* и
от 10 до 12.5 мг/дм3(мг/л) Мд2*.
Наряду с тем. что содержание марганца в следовых количествах необходимо для роста, концен
трация ионов марганца не должна превышать 8 мг/дм3 (мг/л). чтобы избежать ложных интерпретаций
резистентности к глицилциклинам [8]. Результат должен быть валидирован по значению МПК тигеци-
клина. соответствующемудопустимому диапазону, при исследовании контрольного штамма Escherichia
coliWDCM 00013.
Так какдля роста микроорганизмов необходимы следовые количества цинка, концентрация цинка
должна быть ниже 3 мг/дм3 (мг/л). чтобы избежать ложных интерпретаций резистентности к имипе-
нему (9] и. потенциально, к другим карбапенемам. Результат должен быть валидирован по значению
МПК имипенема. соответствующему допустимому диапазону, при исследовании контрольного штамма
Pseudomonas aeruginosa WDCM 00025.
Концентрации катионов кальция, магния, марганца и цинка следует определять с помощью масс-
спектрометрии с индуктивно связанной плазмой (ИСП МС) или пламенной атомно-абсорбционной
спектроскопии (ПААС) [10].
Так как иные ионы, влияющие на результаты определения чувствительности кдругим антимикроб
ным препаратам, не включены в настоящий стандарт, они должны учитываться производителями при
определении чувствительности к антимикробным препаратам методом последовательных разведений
в бульоне Мюллера-Хинтон. К задействованным антимикробным препаратам относятся даптомицин
(11) и полимиксин (12). При определении чувствительности к даптомицину бульон Мюллера-Хинтон
должен быть дополнен Са2* до концентрации 50 мг/дм3(мг/л). Инструкции по приготовлению среды
и определению чувствительности к антимикробным препаратам приведены в ИСО 20776-1.
4.2.4 Другие компоненты среды
Среда должна иметь массовую концентрацию тимидииа менее 0.03 мг/дм3 (мг/л). для обеспече
ния получения валидного результата МПК триметоприма-сульфаметоксазола s 0,5/9.5 мг/дм3(мг/л) при
исследовании контрольного штамма Enterococcus faecalis WDCM 00087 (13).
4.2.5 Специфические корректировки, выполняемые производителем
Для антимикробных препаратов, включенных в таблицу 1:
a) включение хлорида натрия (2 % массы к объему NaCI) до концентрации 20 г/дм3(г/л) в бульон
необходимо для выявления устойчивости к метициллину у Staphylococcus spp. при исследовании с
оксациллином;
b
) при исследовании тигециклина методом микроразведений в бульоне для приготовления план
шетов для определения МПК необходимо использовать среду, приготовленную в день использования.
Среда должна быть приготовлена не ранее 12 ч до момента подготовки планшетов; тем не менее план
шеты могут быть заморожены для последующего использования. Дополнительная информация при
ведена в ИСО 20776-1.
Производители могут выбрать для тестирования дополнительные антимикробные препараты и
штаммы, а также среду Мюллера-Хинтон, обогащенную для роста прихотливых штаммов. Ожидаемые
характеристики должны быть валидированы.
Для микроорганизмов, не включенных в таблицу 1 (например, для расширенного тестирования по
усмотрению производителя);
c) исследование прихотливых микроорганизмов, таких какстрептококки и Haemophilusspp. требует
добавления ростовых добавок (например, крови или компонентов крови). Если партию агара или бульо на
Мюллера-Хинтон, прошедшую валидацию в соответствии с критериями, приведенными в настоящем
стандарте, используют для тестирования прихотливых микроорганизмов, то после добавления допол
нительных компонентов полученные значения МПК или диаметры зон должны попадать в приемлемые
диапазоны МПК. приведенные в ИСО 20776-1 для конкретной среды и тестируемого микроорганизма.
Влияние свойств среды на результаты определения чувствительности к отдельным антимикроб
ным препаратам изложено в приложении А (таблицы А.1. А.2).
4