ГОСТ Р 59786—2021
производителей могут различаться по диаметру (диаметр измеряется по внутреннему основанию дна
чашки), и объем агара, необходимый для обеспечения заданной толщины, вычисляют по формуле
3,143 радиус чашки Петри (см) в квадрате толщина среды (см).
Приемлемый диапазон толщины среды для круглых чашек Петри с внутренним диаметром 90,
100 и 150 мм достигается с помощью объемов среды — от 23 до 31 см3(мл), от 28 до 39 см3 (мл) и от
62 до 88 см3(мл) соответственно. Для чашек Петри других размеров следует вычислять
необходимый объем среды.
5.2.3 Добавка катионов и химический состав агара Мюллора-Хинтон
Агар должен содержать достаточную концентрацию катионов, чтобы обеспечить соответствую
щий рост и позволить исследователю определять диаметры зон подавления роста для контрольных
штаммов в диапазонах, указанных в 5.4.
Концентрации Са2* и Мд2* в среде должны обеспечивать получение значений диаметров зон по
давления роста Pseudomonas aeruginosa вокруг дисков с аминогликозидами в пределах ожидаемого
диапазона, о чем будет свидетельствовать значение диаметра зоны подавления роста Pseudomonas
aeruginosa WDCM 00025 вокруг диска с гентамицином в пределах допустимого диапазона.
Незначительное количество марганца необходимо для роста микроорганизмов, однако его кон
центрация должна быть ниже 8 мг/дм3 (мг/л), это необходимо для предотвращения получения резуль
татов о ложной резистентности при оценке чувствительности к глицилциклинам [8]. Это должно быть
определено (оптимизировано) путем оценки чувствительности в пределах допустимых диапазонов с
использованием контрольного штамма Escherichia coliWDCM 00013 и антибиотика тигециклина.
Чтобы избежать ложных результатов при исследовании резистентности к карбапенемным анти
биотикам. среда должна иметь концентрацию цинка ниже 3 мг/дм3(мг/л). что определяется путем изме
рения диаметра зоны при использовании контрольного штамма Pseudomonas aeruginosa WDCM 00025 и
антибиотика имипенема в пределах допустимых диапазонов. Известно, что избыточная концентрация
цинка влияет и на результаты оценки чувствительности не только к имипенему, но и к другим карбапе-
немам.
5.2.4 Другие компоненты среды
Среда должна иметь массовую концентрацию тимидииа менее чем 0.03 мг/дм3(мг/л). что можно
проверить с использованием контрольного штамма Enterococcus faecalis WDCM 00210 и триметопри-
ма-сульфаметоксаза: при допустимой концентрации тимидина характерно образование четкого конту ра
зоны подавления роста с диаметром *20 мм; альтернативно возможно использование контрольного
штамма Enterococcus faecalis WDCM 00087 с оценкой соответствующего допустимого диаметра пода
вления роста.
Плотность геля требуется для воспроизводимых размеров зон подавления роста, которые долж
ны соответствовать требованиям контроля качества.
5.2.5 Дополнительные добавки
Определение чувствительности прихотливых микроорганизмов, таких как стрептококки и
Haemophilus spp., требует добавления ростовых добавок (например, крови или компонентов крови).
Агар Мюллера-Хинтон или партии бульона, которые соответствуют всем критериям контроля качества,
приведенным в настоящем стандарте, могут быть использованы для исследования прихотливых микро
организмов. При этом, после добавления конкретных добавок в среду, необходимо проводить тестиро
вание контрольных штаммов. Полученные значения МПК или диаметры зон подавления роста должны
быть в границах допустимых значений, приведенных в [5] или [3] для соответствующих контрольных
штаммов и тестируемой среды с добавкой.
В А.2 (приложение А) приведена информация о специфическом влиянии отдельных компонентов
среды и условий тестирования на активность антимикробных препаратов. Микрорганизмы/антимикроб-
ные препараты, данные о которых не указаны в таблице А.2 (приложение А), могут быть исследованы
производителем по своему усмотрению.
5.3 Процедура тестирования производственных партий дегидратированного агара
Мюллера-Хинтон
Диско-диффузионный метод должен использоваться для оценки производственных партии МХА.
Процедуры приготовления чашек, проведения и учета результатов теста, а также хранения штамма
приведены в [5] и (3]. Эти процедуры должны соблюдаться с ограничениями, указанными ниже.
7