ГОСТ Р 57477—2017
♦
D-8-гидроксибутират + НАД
ГБД Г
» ацетоацетат + НАДН + Н.
б) в присутствииферментадиафоразы НАДН взаимодействуете INTсобразованиемформазама:
диафораза
НАДН + INT+ Н
+
----------------------►НАД + формазан.
Содержание D-бета-оксимасляной кислоты эквивалентно количествуобразовавшегося формаза-
на и определяется по изменению оптической плотности реакционного раствора, измеренной при длине
волны492 нм. Зависимостьоптической плотностиотмассовой концентрации D-бета-оксимасляной кис
лоты в колориметрируемом растворе линейна в диапазоне от 0.1 до 4.0 мкг/см3. Определению
могут мешать редуцирующие вещества пробы, взаимодействующие с INT (аскорбиновая кислота,
цистеин, сульфиты).
5Средства измерений, вспомогательное оборудование, посуда,
реактивы, материалы
5.1 Весы неавтоматическогодействия по ГОСТOIML R 76-1 высокого класса точности ипредела
мидопускаемой абсолютной погрешности ±0,001 г.
5.2 Спектрофотометр, позволяющийпроводитьизмеренияоптическойплотностивдиапазоне от 0
до 2 Б при длине волны 492 нм.
5.3 Иономер или pH-метр с диапазоном измерений от 1до 14 ед. pH идопустимой погрешностью
измерения ±0,05 ед. pH.
5.4 Термометр жидкостнойстеклянный поГОСТ28498 сдиапазоном измеренияот 10®Сдо 50 *Си
погрешностью ±1 °С.
5.5 Секундомер или секундомер-часы с ценой деления0.2 с.
5.6 Кюветы кварцевые или стеклянныефотометрические сноминальной толщиной поглощающе
го слоя 10 мм (допускается использовать аналогичные одноразовые пластиковые кюветы).
5.7 Гомогенизатор (блендер) погружной.
5.8 Баня водяная или жидкостной термостат, позволяющие поддерживать температуры
(70 ± 2)°С и(85 ± 2) °С.
5.9 Микродозаторы пипеточные номинальной вместимостью 20 мм3. 50 мм3 и микродозаторы
переменного объема от 100 до 1000 мм3 с относительной погрешностью дозирования не более ±1 % с
соответствующими наконечниками по ГОСТ 28311.
5.10 Мешалка магнитная лабораторная.
5.11 Колбы мерные 1-25-2,1-50-2,1-100-2,1-250-2,1-500-2,1-1000-2 по ГОСТ 1770.
5.12 Стаканы В-1-25. Н-1-100 и В-1-150 по ГОСТ25336.
5.13 Цилиндры мерные 1-25-2 и 1-50-2 по ГОСТ 1770.
5.14 Пипетки с одной отметкой 1-1-1,1-2-2,1-2-10 по ГОСТ 29169.
5.15 Пипетки градуированные 1-2-1-1,1-2-1-5и 1-2-1-10 по ГОСТ29228.
5.16 Колбы конические Кн-1-50-14/23 и Кн-1-100-14/23 по ГОСТ25336.
5.17 Пробирки ПЗ-5 ХС и ПЗ-10 ХС по ГОСТ 25336.
5.18 Воронки В-56-80 ХС по ГОСТ25336.
5.19 Бумага фильтровальная по ГОСТ 12026.
5.20 Палочки стеклянные.
5.21 Шпателидля перемешивания растворов в фотометрических кюветахили пленка лаборатор
ная герметезирующая.
5.22 Вода дистиллированная по ГОСТ6709.
5.23 Водабидистиллированная.
5.24 Спирт этиловый 96 %-ныйтехнический гидролизный ректификованный по ГОСТ Р 55878.
5.25 Спирт н-октиловый (н-октанол), массоваядоля основного вещества не менее 99 %.
5.26 Калий железистосинеродистый 3-водный (K4[Fe(CN)e] •ЗН20, ферроцианид, гексациано-
феррат(И) калия) по ГОСТ 6816, высший сорт.
5.27 Цинксернокислый 7-водный по ГОСТ4174, х. ч.
5.28 Натрия гидроокись по ГОСТ4328, х. ч.
5.29 Калия гидроокись по ГОСТ 24363, х. ч.
5.30 Калийфосфорнокислыйдвузамещенный 3-водный по ГОСТ 2493, ч. д. а.
3