ГОСТ 33675—2015
Срок хранения раствора при температуре от 2 °С до 10°С в склянке из темного стекла — не бо
лее 30 сут.
7.2.1.3 Приготовление карболового фуксина Циля
Для приготовления карболового фуксина Циля 1 г основного кристаллического фуксина
растирают в ступке с 5 г кристаллического фенола и 0.5 см1 глицерина, добавляя небольшими
порциями 96 %-ный этиловый спирт в объеме 10 см3, а затем при постоянном помешивании в ступку
добавляют 100 см3 дистиллированной воды. Полученный раствор фильтруют через бумажный
фильтр в колбу вместимостью 200 см3.
Срок хранения раствора при температуре 18 °С — 22 °С во флаконах из темного стекла с при
тертой пробкой —не более 6 мес.
Непосредственно перед работой к одной части полученного раствора карболового фуксина
Циля добавляют девять частей дистиллированной воды.
7.2.1.4 Приготовление 0,75 %-ного и 1,0 %-ного водных растворов малахитового зеленого
Берут 0.75 или 1,00 г малахитового зеленого и растворяют в 100 см3 кипящей дистиллирован
ной воды.
Срок хранения раствора притемпературе от 2° Сдо 8" С— не более 1мес.
7.2.1.5 Приготовление 0.5 %-ного раствора уксусной кислоты
Берут 0,5 см3уксусной кислоты и добавляют 99,5 см3дистиллированной воды.
Срок хранения раствора при температуре от 2 °Сдо 8 °С — не более 1 мес.
7.2.1.6 Приготовление 1 %-ного водного раствора метиленового синего
Берут 1 г метиленового синего и растворяют в 100 см3 дистиллированной воды.
Срок хранения раствора при температуре от 2 °Сдо 8 °С — не более 1мес.
7.2.1.7 Приготовление 2 %-ного водного раствора сафранина
Берут 2 г сафранина и растворяют в 100 см3дистиллированной воды.
Срок хранения раствора при температуре от 2 °Сдо 8 °С— не более 1мес.
7.2.1.8 Приготовление 5 %-ного спиртового раствора йода
Берут 5 г кристаллического йода и переносят в мерную колбу вместимостью 250 см3, добавляют 10 г
калия йодида и равные объемы дистиллированной воды и 96 %-ного этилового спирта, доводя раствор до
объема 100 см3.
Срок хранения раствора при температуре не выше от 2 °С до 25 °С в склянке из темного стекла
— не более пяти лет.
7.2.1.9 Приготовление 3 %-ного спиртового раствора гидроокиси калия
Берут 3 г гидроокиси калия, растворяют в 5 см3дистиллированной воды и в мерной колбе вме
стимостью 200 см’ доводят объем раствора 96 %-ным этиловым спиртом до 100 см3. Декантируют
прозрачный раствор.
Срок хранения раствора при температуре не выше 25 °С не более одного года.
7.2.2 Приготовление мазков
7.2.2.1 Из проб патологического материала по 6.2 делают по два мазка. При исследовании
абортированных плодов готовят мазки-отпечатки из паренхиматозных органов (печени, селезенки),
котиледонов плодовых оболочек и другого плотного материала, а жидкий материал (содержимое же
лудка, жидкости брюшной и грудной полостей, околоплодную жидкость) наносят на предметные стек ла
пастеровской пипеткой.
7.2.2.2 Для приготовления мазков-отпечатков используют чистые обезжиренные предметные
стекла. Абортированный плод вскрывают, поверхность паренхиматозных органов, котиледонов плодо
вых оболочек и другого плодного материала стерилизуют, прикладывая раскаленный шпатель или об
жигая факелом, смоченным 95 %-ным этиловым спиртом. Стерильными ножницами вырезают кусочки
размером 1,5 * 1,0* 1.5 см и прикладывают поверхности срезов к предметному стеклу (по три отпечат ка
на два предметных стекла). Мазки-отпечатки высушивают на воздухе в течение 5 мин и фиксируют над
пламенем горелки. Мазки-отпечатки на одном предметном стекле окрашивают по Козловскому или
Стампу, на другом — по Граму.
7.3 Проведение исследования
7.3.1 Окрашивание по Граму
Для окраски мазков по Граму на фиксированный мазок по 7.2.2 кладут кусочек фильтровальной
бумаги, наносят кристаллический фиолетовый или генциан фиолетовый и выдерживают в течение 2
мин. после чего снимают бумагу, сливают краску, промывают дистиллированной водой и наносят на
мазок раствор
Л
юголя (мазок чернеет). Через 1 — 2 мин раствор сливают и наносят 96 %-ный этиловый
спирт на 0.5 —1.0 мин. Затем мазок промывают дистиллированной водой и дополнительно окрашивают
разведенным в соотношении 1:10 фуксином Циля в течение 1-2 мин. Краску сливают, промывают дис
тиллированной водой и просушивают мазок фильтровальной бумагой.
7