ГОСТ 33505—2015
Таблица 9 — Термоциклические условия для ПЦР с ОТ с праймерами CR8597F/CR9023R
Температура,
°С
Время
Число циклов
95
15 мин
1
35
95
55
72
30 с
30 с
1 мин
72
10 мин
1
4
Хранение
—
Примечание — При использовании комплектов реагентов с другими типами Taq-полимеразы термоци
клические условия корректируют в соответствии с инструкциями изготовителей.
Анализ результатов ПЦР осуществляют с применением горизонтального электрофореза в 2%-ном
агарозном геле. При положительном анализе обнаруживают ампликоны молекулярной массой 427 п. н.
8.4.4.5 Идентификация штамма PPV-W
Для специфического выявления штамма PPV-W используют пару праймеров W8328F/W8711R
(см. 6.5).
Проводят ОТ в соответствии с термоциклическими условиями, приведенными в таблице 3.
Реакционную смесь для ПЦР готовят в соответствии с 8.4.2.2.
ПЦР проводят на амплификаторе при термоциклических условиях, указанных в таблице 10.
Таблица 10 — Термоциклические условия для ПЦР с ОТ с праймерами W8328F/W8711R
Температура,
°С
Время
Число циклов
95
15 мин
1
35
92
62
72
30 с
30 с
1 мин
72
10 мин
1
4
Хранение
—
Примечание — При использовании комплектов реагентов с другими типами Taq-полимеразы термоци
клические условия корректируют в соответствии с инструкциями изготовителей.
Анализ результатов ПЦР осуществляют с применением горизонтального электрофореза в 2%-ном
агарозном геле. При положительном анализе обнаруживают ампликоны молекулярной массой 384 пар п.
н.
9 Требования к протоколу исследования
Протокол исследования должен включать следующую информацию:
- латинское наименование идентифицированного вредного организма;
- дату выявления и идентификации вредного организма;
- код или номер образца (для возможности отслеживания);
- природу зараженного материала, в том числе, по возможности, латинское наименование рас
тения-хозяина;
- происхождение (включая географическое местонахождение, если оно известно) зараженного
материала и место его задержания или выявления вредного организма;
- описание признаков или симптомов (включая фотографии в соответствующих случаях, или ука
зание об их отсутствии);
- методы выявления и идентификации вредного организма, а также результаты, полученные с
помощью каждого метода;
19