ГОСТ 33505—2015
Примечание — При использовании наборов реагентов сдругими типами Taq-полимеразы термоцикличе
ские условия корректируют в соответствии с инструкциями изготовителей.
Анализ результатов ПЦР осуществляют с применением горизонтального электрофореза в 2%-ном
агарозном геле. При положительном анализе обнаруживают ампликоны молекулярной массой 198 п. н.
8.4.4.2Идентификация штамма PPV-Rec
Для специфического выявления штамма PPV-Rec используют пару праймеров mD5/mM3 (см. 6.5).
Проводят ОТ в соответствии с термоциклическими условиями, приведенными в таблице 3.
Реакционную смесь для ПЦР готовят в соответствии с 8.4.2.2.
ПЦР проводят на амплификаторе при термоциклических условиях, указанных в таблице 7.
Таблица 7 — Термоциклические условия для ПЦР с ОТ с праймерами mD5/mM3
Температура, °С
Время
Число циклов
95
15 мин
1
35
95
60
72
30 с
30 с
1 мин
72
10 мин
1
4
Хранение
—
Примечание — При использовании комплектов реагентов с другими типами Taq-полимеразы термоци
клические условия корректируют в соответствии с инструкциями изготовителей.
Анализ результатов ПЦР осуществляют с применением горизонтального электрофореза в 2 %-ном
агарозном геле. При положительном анализе обнаруживают ампликоны молекулярной массой 605 п.н.
8.4.4.3Идентификация штамма PPV-C
Для специфического выявления штамма PPV-C используют пару праймеров CSoC-2/HSoC-2
(см. 6.5).
ОТ проводят в соответствии с термоциклическими условиями, приведенными в таблице 3.
Реакционную смесь для ПЦР готовят в соответствии с 8.4.2.2.
ПЦР проводят на амплификаторе при термоциклических условиях, указанных в таблице 8.
Таблица 8 — Термоциклические условия для ПЦР с ОТ с праймерами CSoC-2/ HSoC-2
Температура, °С
Время
Число циклов
95
15 мин
1
35
95
62
72
30 с
30 с
30 с
72
5 мин
1
4
Хранение
—
Примечание — При использовании комплектов реагентов с другими типами Taq-полимеразы термоци
клические условия корректируют в соответствии с инструкциями изготовителей.
Анализ результатов ПЦР осуществляют с применением горизонтального электрофореза в 2 %-ном
агарозном геле. При положительном анализе обнаруживают ампликоны молекулярной массой 193 п. н.
8.4.4.4Идентификация штамма PPV-CR
Для специфического выявления штамма PPV-CR используют пару праймеров CR8597F/CR9023R
(см. 6.5).
Проводят ОТ в соответствии с термоциклическими условиями, приведенными в таблице 3.
Реакционную смесь для ПЦР готовят в соответствии с 8.4.2.2.
ПЦР проводят на амплификаторе при термоциклических условиях, указанных в таблице 9.
18