ГОСТ 33505—2015
7.1.1.3 Приготовление экстрагирующего буферного раствора
Вариант 1
В мерную колбу вместимостью 500 см3 наливают 400 см3 промывочного буферного раствора по
7.1.1.2, добавляют 10 г поливинилпирролидона и 1 г яичного или бычьего сывороточного альбумина.
Доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают.
Вариант 2
В мерную колбу вместимостью 500 см3 наливают 400 см3 промывочного буферного раствора по
7.1.1.2, добавляют 10 г поливинилпирролидона и 2,25 г ДИЕКА молярной концентрации 0,01 моль/дм3.
Доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают.
Срок хранения экстрагирующего буферного раствора в колбе в холодильной камере при темпера
туре от 2 °С до 4 °С — не более 2 сут.
7.1.1.4 Приготовление стабилизирующего HEPES буферного раствора с pH 8,0
В мерной колбе вместимостью 1000 см3 с 825,7 см3дистиллированной воды растворяют 238,3 г
HEPES молярной концентрации 0,02 моль/дм3. Доводят 10%-ным раствором гидроокиси калия pH до 8,0
и перемешивают.
Срок хранения HEPES буферного раствора в колбе в холодильной камере при температуре от
2 °С до 5 °С — не более 5 сут.
7.1.1.5 Приготовление фосфатного буферного раствора молярной концентрации 0,03 моль/дм3,
pH 8,5
В мерной колбе вместимостью 1000 см3 с 500 см3дистиллированной воды растворяют 3,5 г ди
гидрофосфата калия и 4,5 г хлорида натрия. Доводят pH до 8,5 с помощью смеси равных объемов 10
%-ного раствора ортофосфорной кислоты и дистиллированной воды и перемешивают.
Срок хранения фосфатного буферного раствора в колбе в холодильной камере при температуре
от 2 °С до 5 °С — не более 10 сут.
7.1.1.6 Приготовление стабилизирующего раствора с ДИЕКА, дифенилдитиомочевиной и кофеи
ном
В мерной колбе вместимостью 200 см3 с 100 см3фосфатного буферного раствора по 7.1.1.5 рас
творяют 3,38 г ДИЕКА молярной концентрации 0,015 моль/дм3, 3,42 гдифенилдитиомочевины молярной
концентрации 0,015 моль/дм3и 5,82 г кофеина молярной концентрации 0,03 моль/дм3 и перемешивают.
Срок хранения раствора с ДИЕКА, дифенилдитиомочевиной и кофеином в колбе в холодильной
камере при температуре от 2 °С до 5 °С — не более 5 сут.
7.1.1.7 Приготовление 1 %-ного стабилизирующего раствора никотина
В мерной колбе вместимостью 100 см3 с 90 см3 дистиллированной воды растворяют 10 см3 нико
тина и перемешивают.
Раствор используют немедленно, хранение не допускается.
7.1.1.8 Допускается использование готовых буферных растворов и стабилизирующих смесей в
соответствии с инструкциями изготовителей.
7.1.2Приготовление растворов для исследований серологическими методами
7.1.2.1 Для проведения исследований потивируса шарки слив серологическими методами исполь
зуют натрий-фосфатный буферный раствор по 7.1.1.1, промывочный буферный раствор по 7.1.1.2, экс
трагирующий буферный раствор по 7.1.1.3, а также следующие буферные растворы.
7.1.2.2 Приготовление карбонатного буферного раствора с pH 9,6
В мерной колбе вместимостью 1000 см3 с 800 см3 дистиллированной воды растворяют 1,59 г
карбоната натрия и 2,93 г гидрокарбоната натрия. Доводят дистиллированной водой до метки и пере
мешивают.
Проверяют pH буферного раствора, который должен быть (9,6 ± 0,1) ед. pH.
Срок хранения карбонатного буферного раствора в колбе в холодильной камере при температуре
от 2 °С до 5 °С — не более 10 сут.
7.1.2.3 Приготовление 0,5 %-ного раствора бычьего сывороточного альбумина
В мерной колбе вместимостью 100 см3 с 99 см3дистиллированной воды растворяют 0,5 см3 бы
чьего сывороточного альбумина и перемешивают.
Срок хранения 0,5 %-ного раствора бычьего сывороточного альбумина в колбе в холодильной
камере при температуре от 2 °С до 5 °С — не более 1 сут.
7.1.2.4 Приготовление буферного раствора для конъюгата
В мерной колбе вместимостью 200 см3 с 100 см3 натрий-фосфатного буферного раствора по
7.1.1.1 растворяют 0,5 г 0,5 %-ного раствора бычьего сывороточного альбумина.
9