ГОСТ ISO 7889—2015
Приложение А
(справочное)
Примечания к методике
Ни одна из двух рекомендованных питательных сред (окисленная MRS и М17) не является полностью селек
тивной.
Большинство штаммов S. thermophillus не образует видимых колоний в окисленной среде MRS в разве
дениях. которые обычно используются для подсчета L. delbrueckii subsp. bulgaricus. Но когда количество молоч
нокислых бактерий в образце йогурта существенно ниже количества стрептококков, для подсчета L. delbrueckii
subsp. bulgaricus следует использовать слабые разведения.
В этих условиях некоторые S. thermophillus могут образовывать незначительные или мелкие колонии
в окисленной среде MRS. Эти колонии можно легко отличить невооруженным глазом от колоний L. delbrueckii
subsp. bulgaricus (последние большего размера) и дополнительно проверить под микроскопом. В дополнение не
которые штаммы L delbrueckii subsp. bulgaricus проявляют слабый рост или не проявляют его вообще в MRS. и
иногда их трудно отличить от S. tharmophUlus.
Если штаммы S. thermophitlus растут медленно или не способны к росту, рекомендуется использование сле
дующих условий:
- более высокая температура инкубации (39—42 ’С и 45 *С в течение 24 ч в аэробных условиях);
- снижение содержания [^-глицерофосфата;
- изменение pH;
- особая осторожность при перемешивании.
Если штаммы L delbrueckii subsp. bulgaricus растут медленно или не способны к росту, рекомендуется ис
пользование следующих условий:
- инкубация в течение более 3 дней до 5 или 6 дней;
- более высокая температура инкубации (40— 42 "С и 45 *С в течение 48 ч в анаэробных условиях);
- изменение pH;
- особая осторожность при перемешивании.
- газовая среда (насыщение С02. только С02 и т. д.).
L. delbrueckiisubsp. bulgaricus при культивировании в анаэробных условиях в йогурте невозможно подсчитать
в MRS. Этой проблемы не возникает при использовании среды LBA(
cm
.примечание к 9.7.1) в анаэробных условиях
при температуре 50 °С
±
0.5 "С в течение 72 ч.
С другой стороны, большинство штаммов L delbrueckii subsp. bulgaricus не образует видимых колоний в
среде М17 в разведениях, которые обычно используются для подсчета S. thermophillus. Это подтверждает ранее
полученные результаты (см. (9)).
Однако некоторые штаммы L delbrueckiisubsp. bulgaricus могут образовывать мелкие колонии в среде М17.
особенно если речь идет об образцах йогурта с большим количеством молочнокислых бактерий, по сравнению с
количеством стрептококков. Эти небольшие неравномерные колонии обычно имеют хлопьевидный или ворсистый
внешний вид. Их легко можно отличить невооруженным глазом (или при помощи увеличительных стекол), дополни
тельно проверив под микроскопом, от равномерных чечевицеобразных колоний S. thermopbitlus, которые больше по
размеру.
Выбор питательной среды, приготовление образца, методики инкубации и подсчета являются наиболее важ
ными составляющими количественного анализа. После ознакомления технических специалистов с методами сра
зу же повышается точность.
Кроме того, нет ни одного исследуемого штамма, который можно было бы использовать для проверки се
лективности штаммов, так как штаммов, используемых в йогуртах, бесчисленное множество, которые отличаются от
используемых при испытаниях, поэтому некоторые штаммы определенных видов (например. S. thermophillus) могут
расти даже в средах, селективных к другим видам (например. L. delbrueckii subsp. bulgaricus).
9