8 Порядок проведения измерений
8.1 Условия хроматографических измерений
ГОСТ 33332—2015
Измерения проводят при следующих параметрах:
•температура термостата колонки....................................(25 ± 5) °С;
■объем вводимой пробы..................................................... от 10 до 20 мм3;
- элюент..................................................................................по 7.5;
- режим элюирования
..........
................................................изократический:
- длина волны спектрофотометрического детектора
.....
235 нм (для бензойной кислоты) и
254 нм (для сорбиновой кислоты).
Скорость подвижной фазы выбирают в соответствии с типоразмерами колонки.
П р и м е ч а н и е -При измерении смеси сорбиновой и бензойной кислот рекомендуется проводить де
тектирование при длине волны 235 нм. При измерении только сорбиновой кислоты допускается использование
длины волны детектирования 254 нм, на которой отклик бензойной кислоты очень слабый. Поэтому при измере
нии только бензойной кислоты детектирование следует проводить при длине волны 235 нм.
В зависимости от типа применяемого хроматографа и хроматографической колонки допускает
ся изменение условий измерений, обеспечивающих требуемое разделение компонентов пробы в по
рядке. указанном в приложении Б.
8.2 Приготовление градуировочных растворов
Готовят ряд градуировочных растворов по шести уровням, от меньшей массовой концентрации
к большей, из аттестованной смеси (см. приложение В) в соответствии с таблицей 1. используя соот
ветствующие пипетки по 5.4 с одной меткой и мерные колбы по 5.21. доводят объем до метки ацетат
ным буферным раствором, приготовленным по 7.3, и перемешивают.
Градуировочные растворы хранят при температуре не выше 4 °С не более одной недели.
Т а б л и ц а 1 - Приготовление градуировочных растворов для измерения сорбиновой и бензойной кислот
N9градуировоч
ного раствора
(’= 1-6)
Вместимость мер Объем аттестованной Массовая доля сор
ной колбы, см3
смеси, взятый для при биновой или бензой
готовления градуироной кислоты
вочного раствора, см’ Хр.л млн’1
Границы погрешности ат
тестованного значения
массовой доли сорбино
вой или бензойной кисло
ты при Р = 0.95. отн. %
11000.505±2.3
2100 1.0 10± 1.5
3100 5.0 50± 1.3
4 50 5.0 100± 1.3
5 5010.0 200± 12
6 5025.0 500± 12
8.3 Установление градуировочной характеристики (градуировка хроматографа)
Построение и обработку градуировочной зависимости выполняют методом абсолютной градуи
ровки с помощью программного обеспечения хроматографа.
Хроматограммы обрабатывают в соответствии с руководством пользователя программного
обеспечениея. Регистрируют пики сорбиновой и бензойной кислот. Компоненты идентифицируют по
абсолютным значениям времени удерживания.
Проводят измерения всех градуировочных растворов, проводя по три параллельных измерения
для каждого уровня, в порядке возрастания массовой концентрации компонентов, полностью запол
няя петлю инжектора в условиях, указанных в 8.1. Регистрируют площади пиков, проверяя приемле
мость выходных сигналов.
Выходные сигналы признают приемлемыми, если относительное среднеквадратичное отклоне
ние (ОСКО) для каждого уровня градуировочных растворов по трем параллельным измерениям,
участвующих в нахождении градуировочной характеристики, вычисленное с помощью программного
обеспечения, не превышает 3 %.
Площадь пика бензойной или сорбиновой кислоты S (среднеарифметическое значение из ре-
5