ГОСТ 33059—2014
одна гибель и отсутствие признаков отравления у остальной группы, заключают с 95 %-ным уровнем
достоверности, что значение LD^ находится выше, чем тестированная предельная доза.
7.1.4 Если происходит одна гибель иналичествуют признаки отравления у остальных птиц (из 5). в
случае гибели 2—4 птиц из 5. а также в случае гибели 2 и более птиц из 10. переходят к этапу 2 последо
вательного опыта, схема которого дана на рисунке 2.
7.1.5 Если все птицы погибли (включая тех. которые были подвергнуты эвтаназии), переходят к по
следовательномуопыту, начиная с этапа 1(рисунок2). Дополнительноедозирование может быть начато
до окончания 14-дневного срока наблюдений.
7.1.6 Для перехода к этапу 2 последовательного опыта необходимо представление о примерной
оценке величины LD^, чтобы установить нужныедля этого этапа уровни дозировок. Используя пример
ные величины из таблицы 1. полученные в опыте, когда предельная доза была 2000 мг/кг массы птицы,
нижние и верхние величины дозировок можно рассчитать по способу, описанному в 7.2.2.2. В методике
расчета рабочей величины LDM используют данные неудачного варианта опыта с предельной дозой при
любой ее величине (см. приложение С).
Т а б л и ц а 1 — Рабочая величина LDs0, необходимая для этапа 2 последовательного опыта и определяемая
на основе смертности, выявленной в опыте с предельной дозой 2000 мг/кг массы птицы
Смертность. %102030
4050
6070
8090
Рабочая величина LD
m
360629442541
22442000
17821574
13581109
7.1.7Нужно отметить, что в некоторых случаях величину LD^ нельзя определить, не проводя
опыт с дозировками выше предельной дозы. Поскольку есть ограничения на использованиеочень высо
ких количеств (концентраций) испытуемого вещества, значение LD5Cдля слаботоксичных веществ не
всегда можно найти.
7.2Простой LDso-тест и градиентный LDS0-TecT
7.2.1 Общие требования
7.2.1.1 Особенности определения доз для каждой стадии последовательного опыта приведены
ниже. Детальная схема приведена на рисунке 2. Примерный порядокопыта, состоящий из 4 этапов, каж
дый из которых продолжается 14 дней, приведен на рисунке 3. Процедура и указания для содержания
птиц контрольной группы описаны в 7.3.
7.2.1.2 Первичная оценка LD50может быть основана на известных представлениях о токсичности
вещества (например, данныхдля млекопитающих) или токсичности других веществ данного химическо го
класса. Для каждой стадии опыта значения минимальной и максимальной доз и шаг (Idose. hdose,
step)должны рассчитываться заново, чтобы определить последовательностьдозировок, используемых
на каждой стадии.
7.2.1.3 Принцип максимального правдоподобия (MLE) — методика, которая позволяет опреде
лить параметры модели, обеспечивающей наиболее точное сходство с имеющимися данными. Этими
параметрами в данном случае являются угол наклона и пересечение с осью координат пробит-функции,
которые используют для расчета LD^. Чтобы использовать MLE. нужно наблюдать в опыте, как мини
мум. два случая возврата идва случая частичной смертности (7.2.1.4). Если эти условия соблюдаются,
последовательный опыт позволяет с помощью MLE найти LD^ и угол наклонафункции поданным, полу
ченным на этапах 1и 2 (при наличии в опыте, как минимум, двух возвратов) и поданным, полученным на
более позднихэтапах(при наличии, как минимум, двух случаевчастичной смертности идвух возвратов).
7.2.1.4 Определение понятий возврата и частичной смертности является существенным для кор
ректного определения условий следующего этапа опыта. Возвраты (случаи, когда процент смертности
при последующей дозе ниже, чем при предыдущей) и частичная смертность (ситуации, когда среди вы
борки птиц, подвергнутых воздействию одной данной дозы, смертность колеблется от 0 %до 100 %) ис
пользуются как критерии, определяющие необходимость проведения следующего этапа опыта или
возможность его остановки. Рекомендуется сначала учитывать случаи частичной смертности, затем,
при необходимости, число возвратов. Пример гипотетического опыта с исходами в виде частичной смер
тности и случаями возврата приведен в приложении А.
7.2.2 Подробное описание последовательного тоста
Обзор общих инструкций по завершению теста приведен в 1.5 ина рисунках 1и 2. Описание схемы
последовательного теста дано в приложении А.
8