ГОСТ 32645-2014
первых 13 недель, затем примерно в 3-месячным интервалом, если состояние здоровья животных и
изменений массы тела не предполагают другой периодичности.
6.6 Офтальмология
Для испытаний продолжительностью более 28 дней офтальмологическое обследование с
помощью офтальмоскопа или аналогичного инструмента должно проводиться до введения
исследуемого вещества и по окончании исследования. Желательно проводить обследование всех
животных или, по крайней мере, животных в группах с высокими дозами и контрольных группах. При
обнаружении изменений глаз, или если клинические признаки указывают на необходимость
проведения обследования, проводится обследование всех животных. Для долгосрочных испытаний
офтальмологическое обследование также должнопроводиться на13 неделе испытания.
Офтальмологическое обследование не проводится, если подобные данные уже доступны из других
исследований с аналогичной продолжительностью и для аналогичных доз.
6.7 Гематология и клиническая биохимия
В случае, когда испытание нейротоксичности проводится в сочетании с испытанием
соматической токсичности повторной дозы, гематологические исследования и клиническая биохимия
должны проводиться в соответствии с Руководством по испытанию соматической токсичности
повторной дозы. Отбор проб должен производиться таким образом, чтобы любые потенциальные
нейроповеденческие эффекты были минимизированы.
6.8 Гистопатология
Нейропатологическое обследование должно быть разработано таким образом, чтобы дополнить
и расширить результаты наблюдений, полученные во время стадии испытания in vivo. Ткани, по
крайней мере. 5 животных У пола / группы (таблица 1) должны быть зафиксированы in situ, с
использованием общепризнанных техник перфузии и методов фиксации. Любые изменения веса
тканей должны быть зарегистрированы. Когда исследование проводится как отдельное испытание
для выявления нейротоксичности или характеристики нейротоксического действия,
остальные животные также могут быть использованы либо для проведения конкретных
нейроповеденческих [17, 18]. нейропатологических [17. 18. 19. 20], нейрохимических [17, 18, 21. 22] и
электрофизиологических [17. 18. 23, 24] процедур, которые могут дополнить представленные в
настоящем руководстве процедурыиобследования,либодля
гистопатологическихобследований.Проведение дополнительных
процедур особенно полезны, когда эмпирические наблюдения и ожидаемые эффекты
указывают на конкретный тип нейротоксичности или наличие органа-мишени [9. 10]. Кроме того,
остальные животные могут также использоваться для стандартных патологических оценок, как
описано в Руководстве по испытанию токсичности повторной дозы.
Общая процедура окрашивания, например, гематоксилин-эозином (Н&Е), должна быть
выполнена для всех образцов тканей, зафиксированных в парафине, затем должны быть проведены
микроскопические обследования. Если наблюдаетсяили ожидаетсяпоявление признаков
периферической нейропатии, должны быть обследованы закрепленные в пластике образцы
периферической нервной ткани. Клинические признаки могут также свидетельствовать о
необходимости осмотра дополнительных тканей или использования специальных процедур
окрашивания. Руководство по дополнительным тканям для обследования представлены в [10. 11].
Также может быть полезным использование соответствующих специальных красителей для
демонстрации конкретных видов патологических изменений [25].
Гистологическое исследование должно быть проведено для отделов центральной и
периферической нервной системы. Обследуемые области, как правило, должны включать: передний
мозг, центральный отдел головного мозга, в том числе рассечение гиппокампа, средний мозг,
мозжечок, варолиев мост, продолговатый мозг, глаза, зрительный нерв, сетчатку, спинной мозга на
шейном и поясничном отделах позвоночника, дорсальные корешковые ганглии, волокна дорсального и
вентрального корешков, проксимальный конец седалищного нерва, проксимальный конец
большеберцового нерва (в колене) и ветви большеберцового нерва в икроножных мышцах. Спинной
мозг и отделы периферической нервной системы должны быть представлены в виде крестовых или
поперечных и продольных срезов. Необходимо уделить внимание сосудам нервной системы. Также
необходимо обследовать образец скелетных мышц, особенно икроножных мышц. Особое внимание
следует уделить участкам с клеточной и волокнистой структурой и отделам ЦНС и ПНС,
подверженным известному влиянию нейротоксинов.
Руководство по нейропатологическим изменениям, обычно возникающим в результате
воздействия токсических веществ, представлено в [10, 11]. Рекомендуется проводить поэтапное
изучение образцов тканей, в котором образцы тканей из групп с высокой дозой сравнивают с
контрольными образцами. Если никакие нейропатологические изменения не наблюдаются в образцах
из данных групп, дальнейший анализ не требуется. Если нейропатологические изменения
7