ГОСТ 32799—2014
в буферном растворе цитрата лития с кислотностью 2.0 ед. pH в мерных колбах вместимостью 25. 50
или 100 см3.
Требуемую массу каждого вещества, используемого для приготовления исходных растворов т.
мг. вычисляют по формуле
т =
С-Ц-У,
(D
Уз
где С - массовая концентрация вещества в градуировочном растворе, определяемая исходя из гра
ниц установленного диапазона линейности аналитического сигнала детектора, мг/см3;
V’t - объем градуировочного раствора, см3;
V2- объем исходного раствора, см3;
Vj - объем исходного раствора, взятый для приготовления градуировочного раствора, см3.
Срок хранения исходных градуировочных растворов при температуре минус 18 3С - не более 6
мес.
6.3.5Для приготовления рабочего градуировочного раствора в мерной колбе вместимостью 100
см3с помощью пипеток подходящей вместимости смешивают объемы от 2 до 10 см3 исходных рас творов
А. Б и В. соблюдая при этом следующее требование: массовая концентрация каждой амино кислоты.
этаноламина или аммиака в градуировочном растворе должна находиться в границах диа пазона
линейности аналитического сигнала детектора, указанного в инструкции по эксплуатации ана лизатора.
Градуировочный раствор готовят непосредственно перед проведением измерений.
6.4 Построение градуировочной характеристики
Процедуры построения градуировочной характеристики и обработку хроматограмм выполняют в
соответствии с руководством пользователя программным обеспечением анализатора.
Для каждого градуировочного раствора выполняют два параллельных измерения в условиях
повторяемости по ГОСТ ИСО 5725-1 (подраздел 3.14). Компоненты идентифицируют по абсолютным
значениям времени удерживания.
Регистрируют площадь пика каждой аминокислоты, этаноламина и аммиака.
Градуировочный коэффициент к, для каждой аминокислоты, этаноламина и аммиака, вычисля
ют по результатам измерений градуировочных растворов с помощью программно-аппаратного ком
плекса сбора и обработки данных или при его отсутствии в составе хроматографа вручную методом
внутреннего стандарта по формуле
С S
C .-S , ’
(
2
)
где С,- массовая концентрация /-ой аминокислоты, этаноламина или амиака в градуировочном рас
творе. определяемая по 6.3.4. мг/см3;
Sc, - площадь пика норлейцина или норвалина (внутреннего стандарта) по результатам изме
рения градуировочного раствора. мВ с;
Сет- массовая концентрация норлейцина или норвалина (внутреннего стандарта) в градуиро
вочном растворе, мг/см’;
S, - площадь пика /-ой аминокислоты, этаноламина или аммиака по результатам измерений
градуировочного раствора. мВ.с.
Результаты вычисления градуировочного коэффициента считаются приемлемыми, если значе
ние коэффициента корреляции составляет не менее 0.995 для каждого компонента градуировочного
раствора.
Градуировочную характеристику строят каждый раз при смене оборудования, колонок, условий
измерений или при выявлении несоответствия метрологическим требованиям результатов оператив
ного контроля или внутреннего аудита.
Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят ежедневно перед началом
работ с применением одного рабочего градуировочного раствора по одной из аминокислот, чередуя их.
В случае обнаружения отклонения результатов измерения массовой концентрации аминокислоты в
градуировочном растворе более чем на 3.5 % проводят его повторное измерение.
В случае повторного отклонения градуировочную характеристику строят заново во всем диапа
зоне измерений.
5