ГОСТ 32369—2014
Приложение Б
Полунепрерывная процедура
Для разложения устойчивых веществ может потребоваться пролонгированная инкубация, до нескольких
месяцев. Длительность испытания в норме не должна превышать 60 дней, если только свойства исходного об
разца воды не сохраняют обновлением исследуемой суспензии. Тем не менее, период испытания может быть
увеличен максимально до 90 дней, без обновления исследуемой суспензии, в том случае, когда распад иссле
дуемого вещества впервые начался в шестидесятидневный период.
При продолжительной инкубации, разнообразие микробного сообщества может сократиться из-за различ
ных механизмов потерь, а также из-за возможного истощения водного образца, важных питательных веществ и
первичных углеродных субстратов. Поэтому для адекватного определения скорости разложения медленно раз
лагаемых веществ рекомендуют использовать полунепрерывный тест. Испытание начинают с использования
полунепрерывной процедуры, если, основываясь на предыдущем опыте, для разложения 20 % вещества потре
буется инкубационный период продолжительностью три месяца. Либо обычный периодический тест может
быть заменен на полунепрерывный, если за 60 дней не произошло разложение исследуемого вещества, при
исполь зовании периодической процедуры. Полунепрерывная процедура может быть остановлена, а испытание
можно продолжить как периодический эксперимент, как только случится значительное разложение (например.
>20%).
В ходе полунепрерывного испытания, каждые две недели проводят замену одной трети обьема исследуе
мой суспензии свежесобранной водой, содержащей исследуемое вещество, до первоначальной концентрации.
Таким же образом добавляют ил в подготовленную воду, до первоначальной концентрации (от 0,01 до 1r/л),
при выполнении испытания с суспендированным илом. При выполнении испытания с суспендированными
твердыми частицами ила. очень важно сохранить систему полностью суспендированной при обновлении воды,
и что время пребывания является одинаковым идля твердых частиц и для воды, поскольку в противном случае
будет утеря на сходность с гомогенной водной системой, не имеющей фиксированных фаз. По этим причинам,
при использо вании полунепрерывного способа, предпочтительно, чтобы диапазон первоначальной
концентрации суспенди рованного ила был ниже указанного интервала.
Предписанное добавление исследуемого вещества подразумевает, что частичное обновление исследуе
мой суспензии не увеличивает ее первоначальную концентрацию, благодаря чему избегают адаптации, которую
часто наблюдают при повышенных концентрациях исследуемого вещества. Поскольку процедура также
включа ет и повторное инокуляцию и компенсацию истощенных питательных веществ и первичных субстратов,
сохраня ется исходное микробное разнообразие, а продолжительность испытания может быть увеличена, в
принципе, до бесконечности. При использовании полунепрерывной процедуры, важно заметить, что остаточная
концентрация исследуемого вещества требует поправки на добавляемое и удаляемое количество
исследуемого вещества в каждой процедуре обновления. Общая концентрация и концентрация растворенного
вещества взаимозаменяемы для соединений с низкой сорбцией. Сорбция не имеет значения (< 5 %) в
определенных условиях (от 0.1 до 1 г твердого вещества/ л) для веществ, у которых log K^„ < 3 (это
действительно в отношении нейтральных, липо фильных соединений). Это можно продемонстрировать на
следующем примере расчета.
Пример.
0,1 г/л твердых веществе можно грубо соотнести с 10 мг углерода на 1 л (фракция углерода.
fc=0,01).
Полагая что:
Log Коп (исследуемого вещества) = 3
Кес = 0.42 х Ко*
Коэффициент разделения. Ka= fc х Кос
Тогда, растворенная доля в общей концентрации С-вода / С-общая (СИ/ CJ составит:
Cw/C, = 1/(1 + К „х SS) =1(1 * K ^ x f cxSS) = 1/(1 + 0.42 х 1(f х 0,01 х 0,1 х 103) = 0.999
17