ГОСТ 32369—2014
продукты разложения не являются летучими, а также при условии использования косвенных опреде
лений С02(см. приложение В).
5.1.3Выдерживают колбы при выбранной температуре (см. подпункт 4.8.1). Извлекают образцы
для химического анализа или для измерения активности 14С в начале испытания (т.е. до начала био
разложения; см. пункт 4.5.1), а затем в нужные временные интервалы в течение всего испытания. От
бор образца может осуществляться извлечением частей пробы (например. 5 мл аликвотная проба) из
каждого дублирующего образца, либо сбором всего содержимого колбы при каждом ее отборе. Мине
рализация исследуемого вещества может быть определена как прямым, так и косвенным способом
(см. приложение В). Обычно, как минимум, требуется пять точек отбора проб в ходе фазы разложе ния
(т.е. после завершенной лаг-фазы), дабы достоверно рассчитать константу скорости, если только не
имеется обоснования, что отбор проб в трех точка является достаточным для быстроразлагаемых
веществ. Для веществ, которые не склонны к быстрому разложению, проводят большее число изме
рений в ходе фазы разложения, расчет к выполняется с помощью большего числа данных. Фиксиро
ванного графика отбора проб не существует, поскольку скорость биоразложения различна; все же
отбор проб рекомендуют проводить раз в неделю, если разложение протекает медленно. Если ис
следуемое вещество разлагается быстро, отбор проб должен проводиться раз в день в течение пер вых
трех дней и на каждый второй или третий день после этого. При определенных обстоятельствах, таких
как вещества быстрого гидролиза, может потребоваться отбирать пробы через несколько ча сов. По
этой причине рекомендуют проводить предварительный тест перед проведением исследова ния, дабы
определить необходимые интервалы отбора проб. Если образец необходим для дополни тельных
специфичных анализов, рекомендуют подготовить большее количество образцов и выбрать те. что
будут анализированы в конце эксперимента, следуя обратной стратегии, т.е. последние об разцы
анализируют первыми (см. пункт 5.5.2) относительно стабильности образцов при хранении).
5.2 Число колб и образцов
5.2.1 Определяют нужное число опытных колб, чтобы обеспечить процедуру;
• тестовыми колбами, по меньшей мере, дублирующие количество колб для каждой концентра
ции исследуемого вещества (желательно, как минимум, трех) или тестовые колбы с несколькими гор
лышками для каждой концентрации, если собирают все содержимое колбы при каждом отборе проб
(обозначение FT);
• холостой пробой, без исследуемого вещества; по меньшей мере, одну колбу с холостой про
бой. содержащей только воду, используемую в испытании (обозначение FB);
• стандартным контрольным образцом; две колбы со стандартным веществом (напр.. анилин
или бензоат натрия, 10 цг/л) (обозначение Fc). Цель сравнительного контрольного образца — под
твердить минимум микробной активности. Если удобно, может использоваться меченное стандартное
вещество также и при отслеживании разлагаемости исследуемого вещества в ходе химического ана
лиза;
• стерильным контрольным образцом, одна или две колбы, содержащие стерилизованную воду,
исследуемую в анализе, для изучения возможного абиотического разложения или другого небиологи
ческого удаления исследуемого вещества (обозначение Fs). Остановить биологическую активность
можно обработкой воды, используемой в испытании, в автоклаве (при 121 вС. 20 мин), либо добавле
нием яда (например, азид натрия (NaN3) в концентрации от 10до 20 r/л. хлорида ртути (НдС12) в кон
центрации 100 мг/л или формалина. 100 мг/л), либо гамма-излучением. Если используют НдС12, то его
ликвидирование должно выполняться как токсичные отходы. В том случае, когда в воду добавляют
большое количество ила, добиться стерильных условий достаточно нелегко; в этом случае рекомен
дуют повторную обработку в автоклаве (например, до трех раз). Необходимо учитывать, что обработ ка
в автоклаве может изменить сорбирующие свойства ила.
• контрольными образцами растворителя, содержащие тестовую воду и тестовую воду со стан
дартным веществом; колбы в двух экземплярах, обработанные одинаковым количеством растворите
ля. с использованием той же процедуры, что применяется для исследуемого вещества. Цель — изу чить
возможность отрицательного воздействия растворителя, прибегая к разложению стандартного
вещества.
5.2.2 При планировании испытании, исследователь должен учитывать относительную важность
возросших экспериментальных повторений в сравнении с увеличившимся числом интервала отбора
проб. Точное необходимое число колб будет зависеть от метода, используемого для измерения раз
ложения (см. пункты 5.1.3 и 5.4.1 - 5.4.5 и приложение В).
8