ГОСТ ISO/TS 21872-2—2013
Необходимо обращать особое внимание на применение метода для продуктов с высоким со
держанием соли, так как конечная концентрация соли в среде может изменять ее качественные ха
рактеристики (см. ИСО 6887-4).
9.3 Вторичное селективное обогащение
9.3.1 Переносят 1 см3культуры, полученной по 9.2. взятой с поверхности, в пробирку, содержа
щую 10
cmj
ASPW (5.1).
9.3.2 Посевы на ASPW инкубируют при (37 ± 1) °С в течение (18 ± 1) ч.
9.4 Выделение и идентификация
9.4.1 Из культур, выросших на среде ASPW (9.2 и 9.3.2) засевают петлей поверхность чашек с
TCBS агаром (5.2.1) таким образом, чтобы получить развитие хорошо изолированных колоний.
Аналогично поступают со второй селективной средой (5.2), используя новую петлю.
9.4.2 Переворачивают чашки с агаром (9.4.1) и помещают их в термостат (6.1). установленный
на 37 °С.
9.4.3 После инкубирования в течение (24 ± 3) ч просматривают чашки (9.4.1 и 9.4.2) на наличие
типичных колоний Vibrio spp. Отмечают их расположение на основании чашки.
Существует две основные морфологические характеристики для колоний Vibrio spp. на TCBS
агаре (5.2.1):
- типичные колонии V. mimicus и V. vulnificus гладкие зеленые (сахарозоотрицательные), от 2 до
3 мм в диаметре;
- типичные колонии V. fluvialis гладкие, желтые (сахарозоположительные). от 2 до 3 мм в диа
метре.
П р и м е ч а н и е — V. parahaerrralyticus и V. cholerae образуют зеленые и желтые колонии на TCBS ага
ре соответственно.
Существует две основные морфологические характеристики для колоний Vibrio spp. на SDS
среде (5.2.2 а)):
- типичные колонии V. mimicus и V. vulnificus фиолетовые и достигают 2 мм или более в диамет
ре. с темным кольцом;
- типичные колонии V. cholerae 01 желтые, 2 мм или более в диаметре, с темным кольцом;
V. cholerae. не относящиеся к штамму 01. могут не образовывать темное кольцо.
Другие Vibrio spp. либо не будут расти на SDS агаре, либо образовывать колонии без кольца.
Существует две основные морфологические характеристики для колоний Vibrio spp. на CPC и
mCPC среде [5.2.2 b) и с)):
- типичные колонии V. vulnificus желтые. 2 мм или более в диаметре и окружены желтой зоной;
- типичные колонии V. cholerae фиолетовые. 2 мм или более в диаметре и окружены голубым
кольцом.
Некоторые виды других Vibrio spp. могут расти на СРС или mCPC агарах; выросшие колонии по
добны описанным выше.
9.4.4 Для выделения V. vulnifivus следует обращать внимание на качество среды СРС или
mCPC.
9.5 Подтверждение
9.5.1Для идентификации Vibrio до вида могут быть использованы разнообразные коммерчески
доступные наборы для биохимической идентификации, обеспеченные базой данных или идентифи
кационными таблицами. Наборы ииокулируются суспензией определяемых бактерий. Суспензии для
инокуляции готовятся в физиологическом растворе или жидкости для разбавления. Наборы для био
химической идентификации основаны на реакциях, полученных при использовании сред, подобных
тем. которые описаны в настоящем стандарте.
П р и м е ч а н и е — Распознавание колоний Vibrio — в значительной степени вопрос опыта, их внешний
вид может иногда различаться не только от вида, но также от партии питательной среды.
5