ГОСТ ISO/TS 21872-2—2013
Приложение В
(обязательное)
Состав и приготовление питательных сред и реактивов
B.1 Щелочная солевая пептонная вода (ASPW)
В.1.1 Состав:
пептон — 20.0 г;
натрия хлорид— 20.0 г;
вода — 1000 см3
В.1.2 Приготовление
Растворяют компоненты в воде, нагревая при необходимости. Если необходимо, регулируют pH так. чтобы
после стерилизации он был 8.6 ± 0.2 при 25 *С.
Разливают среду в пробирки или колбы подходящего объема, чтобы получить порции, в количествах, тре
буемых для анализа (см. 9.1 и 9.3.1). Стерилизуют вавтоклаве 15 мин при 121 °С.
В.2 Тиосульфат-цитратный желчный и сахарозный (TCBS) агар
В.2.1 Состав:
пептон — 10,0 г;
дрожжевой экстракт — 5.0 г;
цитрат натрия — 10.0 г.
тиосульфат натрия — 10,0 г;
цитрат железа (iii) — 1.0г;
натрия хлорид- 10.0 г;
сухая бычья желчь — 8.0 г;
сахароза — 20.0
г;
бромтимоловый голубой — 0,04
г;
тимоловый голубой — 0.04
г;
агар — 8.0-18.0 г”
вода — 1000 см5.
В.2.2 Приготовление
Растворяют компоненты или дегидратированную основу в воде доведением до кипения.
Если необходимо, регулируют pH так. чтобы он составлял 8.6 ± 0.2 при 25 "С. Не автоклавируют.
В.2.3 Приготовление чашек с агаром
Разливают в чашки Петри по 15 — 20 см5свежеприготовленной среды, охлажденной приблизительно до
50 °С и оставляют для застывания.
Непосредственно перед использованием тщательно подсушивают поверхность агара (предпочтительнее
после снятия крышек и переворачивания чашек).
В.2.4 Контроль среды
Для руководства см. (1). (2].
Для количественной оценки эффективности роста для каждой партии TCBS агара, используют солевой пи
тательный агар (SNA) как сравнительную среду и следующие штаммы:
- V. parahaemolyticus: NCTC 10885:
- V. fumissii: NCTC 11218:
- Escherichia coli: ATCC 25922. 8739 или 11775.
Эффективность роста рассчитывают по формуле
<NTCes/Ni4A)-10O.
где N — количество выросших колоний.
Эффективность роста должна составлять по меньшей мере 50 % для любых видов Vibrio (орга
низмы положительного контроля) и менее 1 % для Е. coli (организмы отрицательного контроля). Ко
лонии V. parahaemolyticus: NCTC 10885 должны быть зелеными (сахарозоотрицательными), а коло
нии V. furnissii: NCTC 11218 должны быть желтыми (сахароэоположительными).
" В зависимости от желирующих свойств агара.
11