ГОСТ ISCVTS 21872-2—2013
В.З Натрий додецил сульфат полимиксин сахарозный (SDS) агар
В.3.1 Основа среды
В.3.1.1 Состав:
протеозопептон — 10,0 г;
мясной экстракт — 5.0 г;
сахароза — 15,0 г;
натрия хлорид — 20,0 г;
натрий додецил сульфат — 1.0 г;
бромтимолоеый голубой — 0.04 г;
крезоловый красный — 0,04 г;
агар— 15,00 г;
дистиллированная вода — 1000 см1
В.З.1.2 Приготовление
Растворяют компоненты в воде. Устанавливают pH 7.6 ± 0,2 при 25 °С. Стерилизуют при 121 °С в течение
15 мин.
В.3.2 Раствор полимиксина В
В.3.2.1 Состав:
Полимиксин В сульфат — 100000 единиц;
Вода — 5 см1.
В.3.2.2 Приготовление
Растворяют компонент в воде. Стерилизуют фильтрацией.
В.3.3 Приготовление готовой среды
Охлаждают основу среды приблизительно до 50 иС и прибавляют 5 см!стерильного раствора полимиксина
В. перемешивают.
В.3.4 Приготовление чашек Петри с агаром
Разливают в чашки Петри по 15 — 20 см1агара. Выдерживают чашки до тех пор. пока поверхность агара
не станет сухой.
В.3.5 Контроль среды
Для руководства см. [1], (2].
Для количественной оценки эффективности роста для каждой партии TCBS агара используют солевой пи
тательный агар (SNA) как сравнительную среду и следующиештаммы:
- V.vulnificus: NCTC 11067 (АТСС 29307);
- V.cholerae: NCTC 8042 (АТСС 14733);
- Escherichia coli: АТСС 25922, 8739 или 11775.
Эффективность роста рассчитывают по формуле
s
(N
sd
/ Nsfit,) ■100,
где N — количество выросших колоний.
Эффективность роста должна составлять по меньшей мере 50 % для любых видов Vibrio и менее 1 % для
Е. coli. Колонии V. vulnificus: NCTC 11067 должны быть пурпуро-зелеными с непрозрачными зонами, а V.
cholerae: NCTC 8042 — желтыми с непрозрачными зонами.
В.4 Целлобиозо-полимиксин-колистин (СРС) агар
В.4.1 Раствор 1
В.4.1.1 Состав
бактериологический пептон — 10,0 п
мясной экстракт — 5,0 n
цитрат железа — 0.1 г;
натрия хлорид — 20,0 г;
бромтимолоеый голубой — 0.04 г;
крезоловый красный — 0.04 г;
агар — 15,0г;
дистиллированная вода — 900 сма.
В.4.1.2 Приготовление
Растворяют компоненты в воде. Устанавливают pH 7.6 ± 0.2.
Автоклавируют при 121 *С в течение 15 мин. Охлаждают приблизительно до 50 аС.
В.4.2 Раствор 2
В.4.2.1 Состав:
целлобиоза — 15,0 г;
колистин — 1360000 единиц:
полимиксин В— 100000 единиц;
дистиллированная вода — 100 см1.
12