ГОСТ 32152—2013
Градуировочные смеси хранению не подлежат.
4.4.16 Получение изопропиловых эфиров молочной и янтарной кислот
В грушевидную колбувместимостью 50 см3вносятуказанныев таблице2 для конкретнойкомбина
ции объемы градуировочных растворов и высушиваютдосуха при температуре 100 °С с помощью рота
ционного испарителя.
В колбу с высушенным остатком добавляют2 см3 реагента по4.4.10, подсоединяютхолодильник,
устанавливают колбу в предварительно нагретый до температуры (60 i 1) °С жидкостный термостат и
выдерживают при этой температуре в течение (70 ± 5) мин. Вынимают из термостата и охлаждают до
комнатнойтемпературы. Добавляют4 см3насыщенногорастворасернокислогоаммония, 1см3стандар
тногораствораацетофенона, приготовленного по4.4.14 (внутреннийстандарт), 2см3 толуола ипереме
шивают содержимое вращательным движением колбы.
Содержимое колбы переносят в делительную воронку вместимостью 50 см3, закрывают, встряхи
вают в течение 1мин и выдерживаютдо разделения слоев. Нижний водный слой сливают иотбрасыва
ют. Верхнийслой переносятв виалувместимостью 5 см3идобавляютпримерно3 г сернокислого натрия.
Виалу покрывают алюминиевой фольгой, закрывают крышкой с отверстием и встряхивают 1—2 раза.
Содержимое виалы используют для хроматографирования.
Срок хранения раствора в холодильнике — не более 48 ч.
4.4.17 Получение изопропилового эфира бета-оксимасляной кислоты
В четыре грушевидные колбы вместимостью 50 см3 вносят 1,5.10 и 15 см3стандартного раствора
бета-оксибутирата натрия (см. 4.4.12) (эквивалентное содержание бета-оксимасляной кислоты в ука
занныхобъемах составляетсоответственно0.5; 2; 5и 7,5 мг). Содержимое колб высушиваютдосуха при
температуре 50 вС с помощью ротационного испарителя.
В каждую колбу с высушенным остатком добавляют 2 см3реагента по 4.4.10 идалее поступают в
соответствии с 4.4.16.
4.4.18 Подготовка хроматографа
Хроматограф готовят в соответствии с инструкцией по эксплуатации.
Рекомендуемые режимы хроматографа:
температура испарителя 200 °С;
температура колонки 140 вС;
температура детектора 200 °С;
расход газа-носителя (азот) 40 см3/мин;
расход водорода и воздуха — в соответствии с инструкцией по эксплуатации хроматографа.
В каждом конкретном случае режимы хроматографа могут отличаться от указанных выше идолж
ны быть подобраны для наилучшего разделения изопропиловых эфиров кислот.
Если регистрация хроматограммы проводится на самописец, то предварительно настраивают
величину выходного сигнала хроматографа и шкалу самописца так, чтобы пики изопропиловыхэфиров
кислот всех указанных в4.4.15 и4.4.16 градуировочных смесей регистрировались без дополнительных
разбавлений. При правильной настройке высота пика внутреннего стандарта составляет примерно 1/3
от всей шкалы самописца. Хроматографирование градуировочных смесей и пробы проводят при
одинаковой настройке хроматографа.
4.4.19 Градуировка хроматографа
Шприцем отбирают из виалы раствор изопропиловыхэфиров кислот (см. 4.4.16,4.4.17), протыкая
иглойалюминиевую фольгу, ивводятв испарительхроматографа (3.0 ± 0,2) мм3отобранного раствора.
Регистрацию хроматограммы проводятдва разадля каждойизуказанных в таблице 1и4.4.17 градуиро
вочных смесей. Измеряют высоту пиков изопропиловых эфиров молочной, янтарной, бета-оксимасля
ной кислот и ацетофенона (внутренний стандарт). Для каждой анализируемой кислоты вычисляют
отношение К высоты пика эфира кислоты к высоте пика внутреннегостандарта истроят графики зависи
мостиКот массы канализируемой кислоты, мг. использованнойдля получения изопропиловыхэфиров
(см. таблицу 1. 4.4.17).
Если пик изопропилового эфира молочной кислоты попадает на «хвост» растворителя, то высоту
этого пика измеряют от базовой линии, экстраполирующей продолжение «хвоста» растворителя в
область пика эфира молочной кислоты.
4.4.20 Приготовление пробы
Отбор и подготовку проб к анализу проводят по ГОСТ 31720.
4.4.20.1 Приготовление водной вытяжки из жидкого или размороженного яичного меланжа
В предварительновзвешенной сухой конической колбе вместимостью 1 дм3взвешивают200 г про
бы с записью результата взвешивания в граммахдо второгодесятичногознака, добавляют 500 см3дис
тиллированной воды ихорошо перемешивают, избегаясильного встряхивания. Затемдобавляют 75см3
7