ГОСТ 32152—2013
4.4.22Экстракция диэтиловым эфиром молочной, янтарной и бета-оксимасляной кислоты
из водной вытяжки пробы и получение их изопропиловых эфиров
В сухуюэкстрагирующуюпробирку 1(см. рисунок1).содержащую 15гсернокислогоаммония, пере
носят из стакана упаренную аликвоту водной вытяжки пробы (см. 4.4.20). смывая остатки дистиллиро
ванной водой и добавляя ее в пробирку до получения объема смеси в пробирке 40 см3 (на пробирке
предварительноделаютотметку на объем40 см3).Добавляют0,5 см3разбавленной (1:1) серной кисло
ты и перемешиваютпутем поднятия иопусканиявставленной в пробиркутрубки. Стаканпромывают при
мерно50см3диэтилового эфираи вливаютегов экстракторчерез вставленную трубку. Подсоединяютк
пробиркехолодильник4(см. рисунок 1). включают какможнобольший потокохлаждающей воды, подсо
единяют экстракционную колбу 5 (см. рисунок 1), содержащую 150 см3диэтилового эфира, и медленно
опускают на нагреватель (электроплитка с асбестовым покрытием или колбонагреватель), недопуская
перегрева эфира. Междуэкстрактором инагревателем помещаютлист термостойкого теплоизолирую
щего материала 7(см. рисунок1)ипроводятэкстракцию в течение времени, необходимогодляэкстраги
рования всех трех кислот (при достаточно быстром кипении эфира, низкой температуре охлаждающей
воды и постоянном потоке возвращаемого в колбу эфира полная экстракция может быть проведена за
3 ч).
Послеокончанияэкстракциидиэтиловыйэфир выпариваютизэкстракционной колбы при темпера
туре 30 °С с помощью ротационного испарителя до объема примерно 1 см3 (если экстракция эфиром
заканчивается в конце дня. то эфир не выпаривают, а колбу с эфирным экстрактом оставляют на ночь
присоединенной к экстрактору).
Для получения изопропиловых эфиров кислот в колбу с упаренным экстрактом добавляют 2 см3
реагента (см. 4.4.10) и далее поступают согласно 4.4.17.
4.5 Проведение измерений
Шприцем отбирают из виалы (3.0 * 0.2) мм3раствора изопропиловых эфиров кислот, экстрагиро
ванных из пробы (см. 4.4.22), протыкая иглой алюминиевую фольгу, ивводят в испаритель хроматогра
фа. Регистрацию хроматограммы проводят два раза. Измеряют высоты хроматографических пиков
изопропиловыхэфиров молочной, янтарной ибета-оксимасляной кислот ивнутреннегостандарта (аце
тофенона) и рассчитывают отношения К, высот пиков кислот к высоте пика внутреннего стандарта. По
полученномузначению К, изградуировочной зависимости исучетом разбавлений определяютмассут
кислоты, содержащейся в аликвоте фильтрата водной вытяжки пробы (среднее значение по
результатам двух вводов раствора в хроматограф).
Если высоты пиков выходят за пределы градуировочных зависимостей, проводят разбавление
анализируемого раствора: из виалы отбирают 1 см3раствора, переносят в другую виалу, добавляют в
нее 1см3 или более раствораацетофенона и 0.2 г сернокислого натрия, накрываюталюминиевойфоль
гой. закрывают крышкой и встряхивают. Отбирают шприцем (3.0 ± 0.2) мм3 полученного раствора и
дважды вводятв испарительхроматографа. При необходимостииспользования растворов изопропило
вых эфиров на следующий день после приготовления их хранят в холодильнике. Для каждой кислоты в
качестверезультатаизмеренийиспользуютвысотупика, укладывающегосяв градуировочныйдиапазон
и соответствующего наименьшему разбавлению раствора. Например, если разбавление требуется
только для молочной кислоты, то содержание этой кислоты определяют по хроматограммам
разбавленного раствора, а содержание других кислот — по хроматограммам неразбавленного
раствора.
4.6 Обработка результатов
Массовую долю (содержание)Х2, млн-1 (мг/кг), молочной, янтарной и бета-оксимасляной кислот в
пересчете на сухое вещество рассчитывают по формуле
х2=тортМ* 121,
(2)
м , м 3Я
где F — коэффициент разбавления раствора изопропиловых эфиров кислот;
т — масса анализируемой кислоты, определенная по градуировочной зависимости по 4.4.20 с
помощью измеренного отношения высот пиков К, изопропиловогоэфира анализируемой кис
лоты и внутреннего стандарта, мг,
М2— масса смеси пробы с водой и реактивами (см. 4.4.20.1 или 4.4.20.2), г;
М, — масса отобранной для анализа аликвоты водной отфильтрованной вытяжки пробы (см.
4.4.20.1 или 4.4.20.2), г;
М3— масса пробы, взятая для анализа, г:
Р — массовая доля сухих веществ в пробе. %, измеренная по ГОСТ 31469.
9