ГОСТ 30363-2013
Б.5.16 Экстракция диэтиловым эфиром бета-оксимасляной кислоты из водной вытяжки
пробы и получоние ео изопропилового эфира
В сухую экстрагирующую пробирку 1 (см. рисунок 1), содержащую 15 г сернокислого аммония,
переносят из стакана упаренную аликвоту водной вытяжки пробы {по Б.5.14), смывая остатки дистил
лированной водой и добавляя ее в пробирку до получения объема смеси в пробирке 40 см3(на про
бирке предварительно делают отмотку на объем 40 см1). Добавляют 0.5 см3разбавленной (1:1) сер ной
кислоты и перемешивают путем поднятия и опускания вставленной в пробирку трубки. Стакан
промывают примерно 50 см3 диэтилового эфира и вливают его в экстрактор через вставленную труб ку.
Подсоединяют к пробирке холодильник 4 (см. рисунок 1). включают как можно больший поток ох
лаждающей воды, подсоединяют экстракционную колбу 5 (см. рисунок 1), содержащую 150 см3ди
этилового эфира, и медленно опускают на нагреватель (электроплитка с асбестовым покрытием или
колбонагреватель). не допуская перегрева эфира. Между экстрактором и нагревателем помещают
лист термостойкого теплоизолирующего материала 7 (см. рисунок 1) и проводят экстракцию в тече
ние времени, необходимого для экстрагирования всех трех кислот (при достаточно быстром кипении
эфира, низкой температуре охлаждающей воды и постоянном потоке возвращаемого в колбу эфира
полная экстракция может быть проведена за 3 ч).
После окончания экстракции диэтиловый эфир выпаривают из экстракционной колбы при тем
пературе 30 °С с помощью ротационного испарителя до объема примерно 1 см3(если экстракция эфи
ром заканчивается в конце дня. то эфир не выпаривают, а колбу с эфирным экстрактом оставляют на ночь
присоединенной к экстрактору).
Для получения изопропиловых эфиров кислот в колбу с упаренным экстрактом добавляют 2
см3 реагента и далее поступают согласно Б.5.11. Получение изопропиловых эфиров проводят как
можно быстрее (не более чем через 2 мин)после выпаривания эфира.
Б.6 Проведение измерений
Шприцем отбирают из виалы 1 мм3раствора изопропиловых эфиров кислот, экстрагирован
ных из пробы (по Б.5.16), протыкая иглой алюминиевую фольгу, и вводят в испаритель хроматографа.
Регистрацию хроматограммы проводят два раза. Измеряют площади хроматографических пиков изо
пропиловых эфиров молочной, янтарной и бета-оксимасляной кислот и внутреннего стандарта (аце
тофенона) и рассчитывают отношения К2 площадей пиков кислот к площади пика внутреннего
стан дарта. По полученному значению К2из градуировочной зависимости и с учетом разбавлений
опреде ляют массу кислоты т . содержащейся в аликвоте фильтрата водной вытяжки пробы
(среднее значе ние по результатам двух вводов раствора в хроматограф).
При необходимости использования раствора изопропилового эфира на следующий день по
сле приготовления его хранят в холодильнике.
Б.7 Обработка результатов
Мх-Му
Массовую долю (содержание) Х2. млн ’ (мг/кг), бета-оксимасляной кислоты в пересчете на су
хое вещество рассчитывают по формуле
x, =moFmM
100
(Б.З)
где F - коэффициент разбавления раствора изопропиловых эфиров кислот;
т - масса анализируемой кислоты, определенная по градуировочной зависимости по 8 с по
мощью измеренного отношения высот пиков К, изопропилового эфира анализируемой кислоты и
внутреннего стандарта, мг;
М2- масса смеси пробы с водой и реактивами (по Б.5.14.1 или Б.5.14.2). г,
М. - масса отобранной для анализа аликвоты водной отфильтрованной вытяжки пробы (по
Б.5.14.1 или Б.5.14.2), г;
М3- масса пробы, взятая для анализа, г;
Р - массовая доля сухих веществ в пробе. %. измеренная по ГОСТ 31469.
За окончательный результат измерения принимают среднеарифметическое значение резуль
татов анализов, выполненных в условиях повторяемости для двух идентичных проб, если выполняет
ся условие приемлемости
15