ГОСТ isorrs 15495/IDF/RM 230-2012
B.8.2 Коровье молоко
Доводят пробу до комнатной температуры. Перед тем, как взять навеску для анализа,
убеждаются, что проба гомогенная осторожным перевертыванием емкости несколько раз.
В.9 Проведение
В.9.1 Методика экстракции
Взвешивают с точностью до 0,01 г 3,00 г молочной смеси для детей раннего возраста (В.8.1) или
коровьего молока (В.8.2) в центрифужную пробирку вместимостью 50 см1(В.5.1). Добавляют 300 мкл
рабочего раствора меченого меламина (IS) (В.4.8.2). Добавляют 200 мкл рабочего раствора меченой
циануровой кислоты (IS) (В.4.6.2). Затем добавляют 19,5 см3 ацетонитрила (В.4.2) и энергично
встряхивают, пока не убедятся в отсутствии сгустков.
Анализируемый раствор обрабатывают ультразвуком в течение 5 мин. затем перемешивают в
течение 5 мин. Центрифугируют раствор для анализа при 4000 g при комнатной температуре в
течение 10 мин. Отбирают примерно 2 см3 надосадочной жидкости пластиковым шприцем и
фильтруют через шприцевой фильтр (В.5.5) в пробирку для анализа HPLC.
В.9.2 Анализ LC-MS/MS
Вводят раствор в хроматограф/масс-спектрометр (LC/MS) для анализа.
П р и м е ч а н и е - Меламин и циануровую кислоту обнаруживают по отдельности в разных прогонах на
LC/MS.
В.9.2.1 Условия HPLC
Подвижная фаза А:раствор ацетата аммония (В.6.2.1);
подвижная фаза В: ацетонитрил (В.6.2.2);
вводимый объем:10 мкл;
колонка:
ZIC-HILIC. 2.1 х 150 мм. 5 мкм, 20 нм:
температура:комнатная температура;
скорость потока:0.4 см3/мин;
градиент:См. таблицу В.З;
отводной клапан:поток HPLC направляется на детектор масс-спектрометра в
течение 4 - 9 мин.
Т а б л и ц а А . 11 - Градиент LC, используемый при анализе меламина или циануровой кислоты
Время.А.В,
мин%%
0 3 97
2 3 97
2.5 20 80
11 20 80
11,5 3 97
16 3 97
Условия HPLC для анализа меламина и циануровой кислоты идентичны. В таких условиях
время удерживания как для меламина, так идля циануровой кислоты составляет - 5 мин.
В.9.2.2 Параметры MS
Настройка на анализируемое вещество выполняется посредством впрыскивания шприцем по
отдельности стандартного раствора меламина и стандартного раствора циануровой кислотыв
концентрации 10 мкг/см3. Скорость впрыскивания шприцем поддерживают постоянной на уровне 5
мкл/мин. используятройник при скорости потока HPLC, равной 0.4 мл/мин. Поток HPLC
выдерживают в соотношении 20 % А и 80 % В. Условия работы прибора для анализа меламина и
циануровой кислоты приведены в таблицах В.4 — В.6.
Т а б л и ц а А , 1 2 - Типичные параметры MS для меламина_____________________
ПараметрыЛинейная ионная ловушка LTQ-XL
Тип ионизации
Напряжение электрораспыления
Полярность
Температура передаточной трубки
Газ
Ток распыления
Напряжение капилляра
Максимальное время ввода
Электрораспыление (ESI)
5 кВ
Положительные ионы
350 °С
Защитный газ: 60 условных единиц.;
вспомогательный газ: 20 условных
единиц.;
продувочный газ: 0
5.6 мкА
20 В
100 мс
20