ГОСТ 31674-2012
микроаквариумы или лунки (в трех повторностях) помещают вышеуказанным способом стилонихии и
заливают их:
а) 200 мкл 1%-ного раствора ацетона в минеральном растворе Лозина-Лозинского (0,1 см3 (100
мкл) ацетона на 10 см3раствора Лозина-Лозинского):
б) 200 мкл минерального раствора Лозина-Лозинского.
Качество ацетона проверяют каждый раз в начале использования новой партии реактива, а
качество раствора Лозина-Лозинского - при приготовлении новой порции. В случае токсичности
исследуемого корма стилонихии:
а) изменяют свою обычную эллипсоидную форму на округлую, а движение - на беспорядочное с
поворотом вокруг своей поперечной оси;
б) прекращают движение и (или) подвергаются распаду - лизису (количество лизированных
клеток зависит от степени токсичности кормов). Токсичность исследуемого корма определяют по
выживаемости стилонихий через 1 ч (при экстракции ацетоном) и через 3 ч (при экстракции водой)
экспозиции.
4.1.4Обработка результатов
Выживаемость стилонихий N. %, вычисляют по формуле
N =—2—100,
(1)
X ,
где N2- среднеарифметическое (из пяти испытаний) значение количества
стилонихий в конце опыта через 1 ч экспозиции, шт.;
W, - среднеарифметическое (из пяти испытаний) значение количества
стилонихий в начале опыта, шт.:
100 - коэффициент перевода результата в проценты.
Вычисления проводят с точностью до первого десятичного знака, а окончательный результат
испытания регистрируют в протоколе с округлением до целого числа. Допускаемое расхождение
между результатами двух параллельных определений при доверительной вероятности Р = 0,95 не
должно превышать 1 %.
Токсичность испытуемого корма определяют из расчета:
а) комбикорма для свиней:
1) от 80 % до 100 % выживаемости стилонихий - корм нетоксичный;
2) от 40 % до 79 % выживаемости стилонихий - корм слаботоксичный:
3) от 0 % до 39 % выживаемости стилонихий - корм токсичный:
б) комбикорма для других видов продуктивных и непродуктивных животных, птиц и рыб;
фуражное зерно и продукты его переработки, концентрированные компоненты комбикормов:
1) от 70 % до 100 % выживаемости стилонихий - корм нетоксичный;
2) от 40 % до 69 % выживаемости стилонихий - корм слаботоксичный;
3) от 0 % до 39 % выживаемости стилонихий - корм токсичный.
4.1.5Оформление результатов
Результаты испытаний записывают в журнал и оформляют акт экспертизы или протокол
испытаний, где указывают наличие или отсутствие токсичности корма и возможность его
использования.
Нетоксичным следует считать корм, если при параллельном биотестировании как водного
раствора ацетонового экстракта, так и водного раствора испытуемого корма определено, что он
нетоксичный.
Нетоксичный корм дальнейшему исследованию не подлежит и используется по назначению без
ограничений.
Слаботоксичные и токсичные корма (хотя бы по одному из испытанных экстрактов) направляют
на биотестирование основными методами, а также на микологические, химико-токсикологические и
бактериологические исследования.
4.2 Биотестирование кормов на колподах (Colpoda steinii)
4.2.1 Основные положения
Метод основан на извлечении из испытуемых кормов фракций токсичных веществ параллельно
ацетоном и водой с последующим воздействием этих веществ на коллоды. Время полного анализа одной
пробы- от 3,5 до 4 ч, десяти проб - от 4.5 до 5 ч.
Данный метод предполагает использование сухой культуры колподы в лабораториях, не
имеющих возможности постоянно поддерживать в активном физиологическом состоянии стилонихии.
Сухая культура колподы для эколого-токсикологических исследований по внешнему виду
представляет собой округлые цисты покоя, прикрепленные к кусочку целлофановой пленки и стенке
7