(Продолжение Изменения № 1к ГОСТ 31674— 2012)
Баня водяная, обеспечивающая работу при температуре 50 °С — 60 °С.
Чашки фарфоровые выпарительные 5 по ГОСТ 9147.
Колбы конические Кн-1(2)—100(250)—24/29(29/32) ТХС по ГОСТ 25336.
Колбы мерные 2—100(250)—2 по ГОСТ 1770.
Цилиндры 1(3)— 50(100)—2 по ГОСТ 1770.
Пробирки П2Т(ПЗ>—10(25, 50) по ГОСТ 25336.
Петля микробиологическая.
Стекла предметные.
Пробирки однократного применения (типа Эппендорф) вместимостью 1.5 см3.
Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.
Марля.
Пептон сухой ферментативный для бактериологических целей по ГОСТ 13805.
Экстракт дрожжевой.
D-глюкоза по ГОСТ 6038, ч.д.а.
Ацетон по ГОСТ 2603, ч.д.а.
Натрий хлористый по ГОСТ 4233.
Стандарт-титр гидроокиси натрия молярной концентрации 0.1 моль/дм3 или натрия гидроокись по
ГОСТ 4328. ч.д.а.
Спирт этиловый технический марки Б по ГОСТ 17299 или спирт этиловый ректификованный тех
нический по ГОСТ 18300.
Кислота азотная по ГОСТ 4461, ч.
Натрий углекислый кислый по ГОСТ 4201.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
Тест-организмы — инфузории Tetrahymena pyriformis (тетрахимена пириформис), идентифици
рованные по морфологическим признакам согласно определителю простейших и протестированные на
активность с помощью модельного токсиканта.
Примечание — Допускается использование других реактивов аналогичной или более высокой
квалификации.
4.3.3 Подготовка к проведению испытаний
4.3.3.1 Подготовка стеклянной посуды
Посуда из стекла для культивирования инфузорий и биотестирования должна быть химически
чистой. Стенки стеклянной посуды осторожно смачивают 10 %-ным раствором азотной кислоты, через
2— 3 ч посуду тщательно промывают водопроводной водой, ополаскивают раствором пищевой соды и
промывают три раза дистиллированной водой. При сильном загрязнении посуды, а также новую посуду
промывают водой, заполняют 10 %-ным раствором азотной кислоты и выдерживают но менее суток,
промывают водопроводной водой, затем тщательно промывают раствором соды, водопроводной и не
менее трех раз дистиллированной водой. Для мытья посуды не разрешается использовать хромовую
смесь, синтетические поверхностно-активные вещества и органические растворители. Чистую посуду
для отбора проб, культивирования инфузорий и биотестирования сушат в сушильном шкафу при тем
пературе 160 °С в течение 1 ч.
Чистую посуду хранят закрытой в защищенных от пыли ящиках лабораторного стола или на за
крытых полках, стеллажах и т.п.
4.3.3.2 Культивирование инфузорий Tetrahymena pyriformis (тетрахимена пириформис)
Для приготовления рабочей среды в 100 см3 дистиллированной воды растворяют 0,5 г пептона,
0.5 г D-глюкозы. 0,1 г дрожжевого экстракта, 0,1 г хлористого натрия. Раствор разливают в пробирки по
3— 5 см3, закрывают ватно-марлевыми пробками и автоклавируют при температуре 130 °С в течение
30 мин. Пробирки с рабочей средой хранят в холодильнике при температуре 10±1 °С в течение 6 мес.
Пробирки с рабочей средой засевают над горелкой микробиологической петлей из культиваци
онной пробирки с инфузориями и устанавливают в термостат с температурой +25 °С. Через 2 сут из
засеянных пробирок инфузории используют при биотестировании в течение 5 сут.
Для хранения культуры Tetrahymena pyriformis (тетрахимена пириформис) пробирку с культурой
на 7 день после пересадки переносят из термостата в холодильник с температурой (10±1) °С, где куль
тура хранится в течение 3 мес.
При случайном заражении культуры Tetrahymena pyriformis (тетрахимена пириформис) посторон
ней микрофлорой культуру пересевают на рабочую среду с добавлением антибиотика амоксицикли-
3