ГОСТ РИСО 17853—2012
3.2Реактивы
При проведении анализа, если не указано иное, используют только реагенты аналитической сте
пени чистоты (ч. д. а.) и дистиллированную воду либо воду эквивалентной чистоты.
Все реакционные растворы перед использованием необходимо профильтровать через фильтр
размерами пор 0,2 мкм или менее во избежание загрязнения образцов посторонними частицами.
3.2.1 Абсолютный этанол.
3.2.2 Ацетон, 100%-ный илиразведенный дистиллированной водой, с объемной долей ацетона 80 %.
3.2.3 Дистиллированная вода.
3.2.4 Фиксатор, например формалин, разведенный дистиллированной водой, с объемной долей
формалина 10 %.
3.2.5 Раствор соляной кислоты HCI с = 0.01 моль/л.
3.2.6 Смесь изопропанола и воды, р = 0.96 и р = 0,90 г/см3 соответственно.
3.2.7 Раствор папаина. 4.8 ед/1.5 мл буфера 250 мМ фосфата натрия, содержащего 25 мМ эти-
лендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА). pH 7,4.
3.2.8 Натрий-фосфатный буфер концентрацией 250 мМ. содержащий 25 мМ ЭДТА, pH 7,4.
3.2.9 Протеиназа К, 2 г/мл в 50 мМ Трис-буфере. pH 7.6.
П р и м е ч а н и е — Для частиц, изолированных из сывороточного лубриканта симулятора сустава, коли
чество должно быть скорректировано в зависимости от процентного содержания сыворотки в лубриканте и началь
ного объема сыворотки, из которого выделялись частицы. См. 5.3.2.
3.2.10 Смола, эпоксидная смола, например EMbed 812.
3.2.11 Додецилсульфат натрия (SDS). 2,5 г/100 мл дистиллированной воды или 3 г/100 мл
80 %-ного ацетона.
3.2.12 Гидроксид натрия NaOH. растворы и гранулы, с = 5 М.
3.2.13 Растворы сахарозы. р= 1.35.1,17.1,08,1,04 и 1,02 г/см3.
3.2.14 Трис-гидрохлорид буфер. Трис-буфер. 50 мМ, pH 7.6.
3.3Аппаратура
Вся аппаратура перед использованием должна быть очищена и трижды промыта дистиллирован
ной водой, предварительно профильтрованной через фильтр размерами пор 0,2 мкм (см. 3.3.6), для
удаления любых посторонних частиц.
3.3.1 Алюминиевый столик для образцов.
3.3.2 Весы точностью минимум 0,1 мг.
3.3.3 Углеродные самоклеящиеся пластины.
3.3.4 Пробирки для центрифугирования разных размеров.
3.3.5 Центрифуга.
3.3.6 Фильтры размерами пор 0.2 мкм для фильтруемых реактивов и дистиллированной воды.
3.3.7 Система фильтрации.
3.3.8 Медные сетки, покрытые формваром, размерами ячеек 200 мещ. для ТЭМ.
3.3.9 Инфракрасный спектроскоп с Фурье-преобразованием (ИКФП).
3.3.10 Нагревательная плита.
3.3.11 Безворсовая ткань.
3.3.12 Пипетки, микропипетки и наконечники.
3.3.13 Поляризационный световой микроскоп.
3.3.14 Поликарбонатные мембранные фильтры размерами пор 10. 1. 0.1. 0.05 и 0.015 мкм для
сбора частиц.
3.3.15 Сканирующий электронный микроскоп СЭМ с модулем энергодисперсионного рентгено-
спектрального анализа (ЭДРСА).
3.3.16 Стерильные чашки Петри с крышками.
3.3.17 Шприц с широким просветом иглы.
3.3.18 Стеклянный гомогенизатор Поттера с тефлоновым пестиком.
3.3.19 Трансмиссионный электронный микроскоп ТЭМ с модулем энергодисперсионного рентге
носпектрального анализа (ЭДРСА).
3.3.20 Ультразвуковой клеточный дезинтегратор, оснащенный титановым микрозондом.
3.3.21 Ультразвуковая ванна.
3.3.22 Водяная баня с перемешиванием и температурным контролем.
2