ГОСТ Р ИСО 21148—2011
А.З Тест на каталазу
А.3.1 Общие требование
Обнаружение этого фермента, который разлагает перекись водорода (Н20 2)на воду и кислород, может быть
проаеденоспомощью бульонной культуры, агаровой культуры или одной единственной колонии наагаровой среде.
А.3.2 Из бульонной культуры
Добавляют в t см3 культуры 0.5 см310-объемного (3 % (массовая доля)] раствора перекиси водорода. Отме
чают возникновение пузырьков кислорода (каталазоположительных) или их отсутствие (каталазоотрицательных).
А.3.3 Из агаровой культуральной среды
Покрывают культуру 1—2 см310-объемного [3 % (массовая доля)] раствора перекиси водорода.
Наблюдают сразу же и по истечении 5 мин независимо от того, сформировались ли пузырьки кислорода
или нет.
А.3.4 Из колонии
Вводят раздельно две капли 10-объемного раствора перекиси водорода на предметное стекло микроскопа.
Отбирают колонию спомощью стерильнойстеклянной или пластиковой палочки (но только не металлической
иглы) и осторожно эмульгируют ее в одну из этих двух капель. Наблюдают сразу же и через несколько минут (не
менее 1 мин), сформировались или нет пузырьки кислорода. В случае сомнения покрывают каждую каплю покров
ным стеклом и сравнивают возникновение пузырьков под обоими покровными стеклами.
Наблюдение можно проводить макроскопически или используя микроскоп с малым увеличением.
А.4 Тест на оксидазу
А.4.1 Общее требование
Обнаружение оксидазы выявляют путем изменения цвета соединения во время окисления под действием
данного фермента.
А.4.2 Реагент
А.4.2.1 Химический состав
Л»,Л1,ЛГ.Л!-тетраыетил-3-р-фенилендиаминдигидрохлорид <СД0Н,6Ы2• 2HCI) 1.0г.
Вода 100 см3.
А.4.2.2 Приготовление
Растворяютреагент вхолодной воде. Приготавливают реагент непосредственно перед егоиспользованием.
Могут использоваться технически чистые диски или палочки. В этом случае следуют рекомендациям изгото
вителя.
А.4.2.3 Метод
Увлажняют фильтровальную бумагу реагентом. Берут пробу бактериальной культуры, полученной из агаро
вой среды, с помощью платиновой иглы или стеклянной или пластиковой палочки (никельхромовая игла дает лож
ный положительный результат)и наносят ее на смоченную фильтровальную бумагу.
А.4.2.4 Интерпретация полученного результата
В случае присутствия оксидазы появляется фиолетово-пурпурный цвет в течение 5—10 с. Если цвет не изме
нился а течение 10с. тест рассматривается как отрицательный.
А.5 Использование биохимических тестов на идентификацию микроорганизмов
Для идентификации могут использоваться существующие в настоящее время биохимические тесты. Вместе
с тем. все коммерческие тесты не обеспечивают одинаковый уровень надежности. Следовательно, их рабочие
характеристики должны оцениваться перед использованием, если только они не были подтверждены изготовите
лем и/или независимой организацией.
13