ГОСТ РИСО 20776-1— 2010
жать неравного нагревания, планшеты для микроразведения должны быть сложены в стопки не больше
чем по пять штук.
Если иначе не определено, планшеты для микроразведения инкубируют при 34 вС — 37 °С окружа
ющей среды в течение (18 ±2) ч для большинства комбинаций антибактериальных агентов и бактерий. Не
должна использоваться атмосфера, обогащенная С 02.
3.7 Чтение результатов
Результаты следует прочитывать только при наличии достаточного роста испытуемого организма (то
есть при явном пятне или определенном помутнении в положительном контроле роста), когда нет никакого
роста в неинокулированном или отрицательном контроле роста (если присутствует) и когда были установле
ны чистота и соответствующая концентрация числа клеток инокулюма. Размер роста в каждой лунке срав
нивают с размером роста в положительном контроле роста и наиболее низкую концентрацию агента, кото
рая полностью тормозит видимый рост, регистрируют как МПК.
3.8 Особые ситуации испытаний, при которых результат МПК может быть ненадежным
В некоторых случаях значение МПК может не отражать истинную активность, поэтому интерпрета
ция результатов испытаний с некоторыми антибактериальными агентами для клинического применения воз
можно должна быть изменена. В этих ситуациях референтный методдолжен быть модифицирован, напри
мер. путем изменения условий инкубации или введением добавок в среду. Кроме того, при использова
нии стандартного метода разведения не всегда могут быть обнаружены определенные механизмы резис
тентности. например, экспрессия некоторых |*-лактамаз. модификации выводящих насосов или целевого
участка антибактериального препарата. В таких случаях МПК следует интерпретироватьс осторожностью
или использовать другую информацию для регулирования клинического лечения. В таблице 3 приведены
несколько комбинаций антибактериальных агентов и бактерий, требующих особого внимания.
Т а б л и ц а 3 — Особые ситуации испытаний
Аитибакгериальные
агенты
Бактерии
Замечания
Aminoglycosides
Enterococcus spp.
Медианы МПК для дикого типа Enterococcus faecalis и
Enterococcus faecium для гентамицина и тобрамицина составля
ют от
8
до
16
мг/л и для стрептомицина — от
8
до 32 мг/л. Амино-
гликозиды демонстрируют синергический эффект при комбина
ции с препаратами, действующими на клеточную стенку (напри
мер. penicillins, carbapenems. glycopeptides). Некоторые штам
мы проявляют резистентность высокого уровня к аминогликози-
дам (МПК
2
500 мг/л). Вотношении таких изолятов синергический
эффект не проявляется. При испытании Enterococcus spp. диа
пазон разведений должен быть достаточным, чтобы определить
резистентность высокого уровня. Время инкубации должно быть
24
ч
для гентамицина и
4 8 ч
— для стрептомицина
P-lactams
Bee
МПК может оказаться недостаточным основанием для тера
певтического решения, если бактерии продуцируют некоторые
[Wactamases; в этом случав МПК следует интерпретировать с ос
торожностью
Methicillin
Oxacillin
Staphylococcus spp.
Микроразведение в бульоне не может надежно обнаружить
резистентность, присущую гену тесА. Следующие модификации
могут усилить способность обнаружить резистентность:
- добавление NaCI до окончательной концентрации 20 r/л в
бульоне;
- инкубация тестов в течение 24 ч;
- температура инкубации 30 "С (не выше 35 °С);
- использование метода прямой суспензии, а не метода вы
ращивания. для подготовки бактериального инокулюма,.
Детекция гена тесА является референтным методом для
обнаружения резистентности к Methicillin/Oxaciilin
Daptomycin
Bee
Среда должна быть дополнена Са++ до конечной концен
трации 50 мг/л
10