ГОСТ Р 53944—2010
бактериологической петлей отсевают в чашки Петрис питательным или мясо-пептонным агаром. Посе
вы инкубируют при температуре (37 ± 1)°С в течение 18—24 ч.
Из выросших наагаре колоний, предположительно относящихся к St. aureus, после проверки маз
ков на чистоту культуры под микроскопом ставят реакцию плазмокоагуляции. Для этого вдве пробирки
помещают по 0.5 см3 разведенной кроличьей плазмы. В одну пробирку вносят петлей исследуемую
суточную агаровую культуру, другую пробирку оставляют незасеянной. Пробирки помещают в термос
тат при температуре (37 ± 1) °С. Учет результатов проводятчерез 2—4 ч и пробирки оставляютдо
утра при комнатной температуре для окончательного учета. Пробирки следует просматривать
осторожно, чтобы не разрушитьобразовавшийся сгусток.
При учете реакции плазмокоагуляции могут наблюдаться три степени активности фермента
коагулазы:
+++♦ — сгусток плотный, при наклоне пробирки неподвижен;
+♦+ — сгусток, имеющий небольшой отсек, при наклоне пробирки подвижен, плотная коагуляция
плазмы;
+♦ — сгусток в виде взвешенного мешочка, неполная коагуляция плазмы собразованием подвиж
ногосгустка в центре плазмы.
Все три варианта являются положительным результатом. Колонии, предположительно относя
щиеся к St. aureus, выросшие на желточно-солевом агаре, бактериологической петлей пересевают в
чашки Петри, содержащиеагаризованнуюсредус маннитом (или мальтозой) ииндикатором феноловым
красным. Посевы термостатируют при температуре (37
а
1) X в течение (24 ± 1)ч. При положительной
реакции вокруг колонии наблюдается желтое окрашивание среды, четко контрастирующее с
пурпурно-красным фоном.
11.3 Для выявления ибиохимической идентификации St. aureusдопускается использование ком
мерческих тест-систем, допущенных к применению в Российской Федерации, которые представляют
собой набор одноразовогоиспользования ввиде планшетасострипами. наднолуноккоторыхнанесены
соответствующие субстраты с индикаторами. Проведение анализа и учет результатов проводят по
инструкции производителя.
11.4 Обработка результатов
11.4.1 Результаты оценивают по каждой пробеотдельно.
Наличие грамположительныхгроздевиднорасположенных мелких кокков вмазкахизхарактерных
колоний на желточно-солевом агаре, положительная реакция плазмокоагуляции, ферментация манни та
и мальтозы с образованием кислоты свидетельствуюто выявлении в 1см3(г) продуктов St. aureus.
Результатзаписывают как «не обнаружены» или «обнаружены» St. aureus в 1см3(г) продукта.
11.4.2 Допускается для целей экспрессного выявления St. aureus и/или подтверждения принад
лежности выделенных культурк St. aureusиспользование подложекили пластинв виде подготовленной
тест-системы, содержащей наборпитательныхвеществ, герметичнозакрытых непроницаемой мембра
ной; иммунохроматографических экспресс-тестов; бактериологических анализаторов, например на
принципе импеданса; методаполимеразной цепной реакции (ПЦР) поГОСТР52833. Проведениеанали за
и учет результатов с использованием таких методов проводятпо инструкциям к прибору.
15