ГОСТ Р 53944—2010
Перед посевом в асептических условиях в колбу добавляют 2 см3 раствора Люголя (см. 6.3.1),
10 см3 50 %-ного раствора серноватистокислого натрия (тиосульфата), 5 см3 стерильной желчи и 1см3
водного раствора бриллиантового зеленого в соотношении 1:1 000. Смесь тщательно взбалтывают.
6.3.23 Желчь
Отобранную асептически желчь крупного рогатого скота прогревают на кипящей водяной бане в
течение 1ч. После отстаивания фильтруют и разливаютпо колбам, стерилизуют текучим паром тридня
подрядпо 20 мин или однократно в автоклаве при температуре (112 ± 1) вС.
Можно использовать сухую желчь, при этом 1 г сухой желчи соответствует 10 см3 натуральной
желчи.
6.3.24 Селенитовая среда Лейфсона
Для приготовлениясреды готовятдва раствора: А и Б.
Раствор А состоит из 5 г пептона, 7 г безводного двузамещенного фосфорнокислого натрия. 3 г
однозамещенного фосфорнокислого натрия, 4 г химически чистой лактозы. 1 дм3дистиллированной
воды. pH (7,0 10,1). Компоненты смешивают, разливают в стерильную посуду по 225 см3и стерилизуют
текучим паром по 30 мин или при (11211) °С в течение 30 мин.
В раствор Б входит 10 %-ный раствор кислого селенистокислого натрия, приготовленного на сте
рильнойдистиллированной воде (готовят перед употреблением).
Передначалом работы к 225 см3 раствора А стерильнодобавляют9 см3раствора Б.
6.3.25 Магниевая (хлористо-магниевая) среда
Среда состоит из трех растворов.
Раствор I: пептон — 4.2 г. натрия хлорид — 7.15 г, калия дигидрофосфат — 1.48 г, дрожжевой
диализат — 9 см3, вода дистиллированная — 890см3.
РастворИ: магния хлорид— 35.7 г. вода дистиллированная — 90 см3.
Раствор III: бриллиантовый зеленый 0.5 %-ный. водный раствор — 0.9 см3.
Все три приготовленныхрастворасмешивают, разливаютв колбы, флаконы, пробирки. Стерилизу
ютпри (112 ♦ 1) еС30 мин.
При отсутствиидрожжевого диализатадопускается заменаегодрожжевым экстрактом.
6.3.26 Среда Крумвидо-Олькеницкого (трехсахарный агар с мочевиной)
Агар питательный сухой — 25 г, лактоза — 10 г. сахароза — 10 г, глюкоза — 1г. железо (III)аммо
ний сульфат (соль Мора) — 0.2 г, натрия тиосульфат (гипосульфит, серноватистокислый натрий) —
0.3 г. мочевина — 10 г, феноловый красный 0.4 %-ный водный раствор — 4 см3, вода
дистиллирован ная — 1дм3.
Соли предварительно растворяют в небольшом объеме дистиллированной воды. Углеводы и
мочевинутакже растворяютв небольшихобъемахводы приподогревании на водяной бане. Сухой пита
тельныйагар расплавляютвоставшемсяобъемеводы при нагревании ипомешивании. Затем всеингре
диенты соединяют, перемешивают с расплавленным агаром, фильтруют через марлевый фильтр,
устанавливаютpH (7.3 ± 0.1), добавляютиндикатор и разливают в стеклянные пробирки по6—7см3.
Среду стерилизуют при температуре (112 ± 1) °С в течение 20 мин. скашивают, оставляя столбик
2.0—2,5 см. Готовая среда бледно-розового цвета. Среду хранят при комнатной температуре не более
7сут.
6.3.27 Дрожжевой экстракт
100 г измельченных хлебопекарных прессованных дрожжей заливают 1 дм3дистиллированной
воды, кипятят при постоянном перемешивании до тех пор. пока не сойдет пена, ипомещаютна 24 ч при (5
± 1) °С в холодильник. Затем эмульсию фильтруют через вату и фильтрат стерилизуют 20 мин при (121
11)вС.
5см3жидкогодрожжевого экстракта равноценны 1гдрожжевого экстракта в порошке.
6.3.28 Солевой бульон
1 дм3мясо-пептонногобульона и 6.5 гхлористого натриясмешивают в колбе вместимостью 2дм3,
разливаютв пробиркипо 10см3.Стерилизуют(2011)минвавтоклаве при температуре(121 11)вС.Хра
нят не более 28 сут при температуре (4 *. 1) °С.
6.3.29 Желточно-солевой агар
К 1дм3солевого бульона по 6.3.31 добавляют 20 г питательного агара, расплавляют на водяной
бане, при необходимостифильтруют через ватно-марлевый фильтр, разливают мерным цилиндром по
100 см3в колбы вместимостью 250см3и стерилизуют при (121 • 1) °С в течение 30 мин. Получают соле вой
агар. Вместо солевого бульона можно использовать как основу сухой питательный агар, мясо-пеп-
тонный бульон, бульон Хоттингера, добавляя 65 г хлористого натрия.
Для приготовления желточной эмульсии надно стерильной чашки Петри помещаюткуриное яйцо,
тщательнопротирают его ватой, смоченнойэтиловым спиртом, и обжигают. Стерильным пинцетом про-
9