ГОСТ Р 53944—2010
мембраной; бактериологические анализаторы, основанные на оптико-электронном принципе и на
принципе импеданса.
Проведение анализа и учет результатов с использованием таких методов проводят по инструкци
ям к прибору.
9 Метод выявления бактерий рода Salmonella
9.1 Сущность метода
Метод основан на использовании сред обогащения с последующим выделением сальмонелл на
дифференциально-диагностическихсредах, атакже на изучении культурально-морфологических, био
химических исерологическихсвойств культур.
9.2 Проведение анализа
25 см3 (г) продукта из средней пробы, с соблюдением стерильности, вносят в колбу, содержащую
225см3однойизсредобогащения (Кауфмана, магниевой, селенитовойили селенит-цистиновойнакопи
тельной). встряхивают и инкубируют при температуре (37 •. 1) °С в течение 16—20 ч. Затем проводят
высев бактериологической петлей (диаметр 0.4—0,5 мм) из сред обогащения в чашки Петри с вис-
мут-сульфитным агаром илисредой Плоскирева. илиагаром Левина.
Чашки Петри с посевом инкубируютпри температуре(37 ± 1) °С. Учетрезультатов проводятнавис-
мут-сульфитном агаре через48 ч, на среде Плоскирева иЛевина — через 18—24 ч.
Сальмонеллы на висмут-сульфитном агареобразуютчерныеколониис характерным металличес
ким блеском, при этом наблюдается прокрашивание в черный цвет участка среды под колонией и
нежныесветло-зеленые колонии.
На средахПлоскиреваиЭндоколониисальмонеллпрозрачные, насредеЛевина — голубоватые.
При отсутствии типичных или предположительно относящихся к бактериям рода Salmonella коло
ний ил и при наличии слабого роста микробов на плотныхдифференциальныхсредахчашкис посевами
повторно инкубируют при температуре (37 ± 1) °С в течение20—24 ч.
Затем снова определяютприсутствие колоний сальмонелл. При обнаружении подозрительных на
сальмонеллы колонийпродолжаютисследование. В противном случае работуспосевами прекращают.
При наличиитипичных, характерныхдлясальмонелл колоний, изнихберутне менеетрехколоний. Если
имеется наоднойчашке менее трехтипичныхколоний, то берутвсе выросшиеподозрительныенасаль
монеллы колонии для пересева в пробирки; со скошенным питательным или мясо-пептоиным агаром, с
мясо-пептонным бульоном, с пептонной водой и на одну издифференциальных сред Ресселя, Крумви-
де-Олькеницкого, Кл игл ера.
Среды Ресселя. Крумвиде-Олькеницкого, Клиглера засевают сначала штрихом на скошенную
поверхность, а затем уколом в глубину столбика.
Посевы инкубируют при температуре (37 ± 1)°С в течение (24 ♦ 1) ч.
Выросшиекультуры споверхностискошенного агара используютдляпостановки реакции агглюти
нации и приготовления мазков. Мазки окрашивают по Граму и микроскопируют.
При использовании в исследованиях тест-наборов для биохимической идентификации бактерий
рода Salmonella окрашивание по Граму необязательно.
Посевы на мясо-пептонном бульоне и пептонной воде используют для определения способности
выделенных культуробразовыватьсероводород и индол.
Подтверждение наличия сальмонелл в продукте дает рост на средах Ресселя. Крумвиде-Ольке
ницкого. Клиглера.
На средахРесселя. Крумвиде-Олькеницкого. Клиглераоцениваютокраскуи газообразование. При
ростесальмонелл всредахРесселя. Крумвиде-Олькеницкого. Клиглера вмалиновый цветокрашивает
ся столбик (за счет расщепления глюкозы), скошенная часть среды остается бледно-розовой при отсут
ствии расщепления лактозы, сахарозы или обоих сахаров. Газообразование устанавливают по
трещинам и разрывам столбиков агара. На средах Крумвиде-Олькеницкого, Клиглера образование
сероводорода обнаруживаютнаоснованиипочернениясреды (оттемнойлиниипоместупротоколасре
ды до разлитого почернения всего столбика). Расщепление мочевины выявляется по восстановлению
первоначального цвета (бледно-розового) столбика среды.
Сальмонеллы мочевину не разлагают, сероводородобразуют.
12