ГОСТ Р 53214—2008
В препаратахнедолжно присутствоватьникакой непредусмотреннойферментативнойактивности
(например, экзонуклеазной), которая может препятствовать ПЦР. Реакционный буфердолжен соответ
ствоватьторговой марке используемой полимеразы.
6 Интерпретация и представление результатов
6.1 Общие положения
Для количественных методов расчет и представление результатов приведены в ИСО 21570 [2] и
ИСО 21572 [4]. Ни один неоднозначный результат недолжен быть представлен.
6.2 Интерпретация контролей
Каждый контроль имеет неоспоримое значение и. если наблюдаемый результат для любого кон
троляотличается от этогозначения, анализдолженбытьповторен. Контрольокружающейсреды может
быть положительным (обнаружен продукт амплификации ожидаемой величины) или отрицательным
(продукта амплификации не обнаружено), но положительный результат должен всегда инициировать
меры поудалению ипредотвращению контаминациилабораторныхпомещений. В том случае, если нео
боснованный результатдля любого издругих контролей получен повторно, должны быть предприняты
меры по удалению/замещению источника(ов). ответственного(ых)за ошибку, после чего анализдолжен
быть повторен. Результаты анализа могут быть представлены только в том случае, когда все контроли
дадут неоспоримые результаты. Неоспоримые результаты для контролей таковы:
- положительные контроли реакции всегда должны быть положительными:
- пустые контроли экстракции всегдадолжны быть отрицательными;
- положительные контроли целевойДНК всегдадолжны быть положительными;
- отрицательные контроли целевойДНК всегдадолжны бытьотрицательными;
- контроли реактивов амплификации всегдадолжны бытьотрицательными.
Контроли ингибирования ПЦРнедолжны проявлятьзначительныхингибиторныхэффектов вотно
шении реакции (для качественного анализа эффекты ингибирования могут быть менее выраженными,
чем для количественногоанализа).
Возможные результаты ПЦР для контролей перечислены в таблице 2. Они используются для
интерпретации/представления отчетовдля результатовдля анализируемой пробы.
Т а б л и ц а 2 — Примеры результатов ПЦР
Амапизирусиап
проба
Положительный
контроль
экстракции
Пустой контроль
экстракции
Отрицательный
контроль целевой
ДНК
Положительный
контроль целевой
ДНК
Интерпретация
результата
+
—
_ ь
♦
Положительный
—
♦
—
—
♦
Отрицательный
♦
♦
♦
—
♦
Недостаточен
для принятия
решения с
-
-
♦
-
-
Недостаточен
для принятия ре
шения с
-
-
-
—
-
Недостаточен
для принятия
решения0
а Продукт ПЦР обнаружен.
ь Продукт ПЦР не обнаружен.
с Процедура должна быть повторена, начиная со стадии экстракции (возможна контаминация).
й Процедура должна быть повторена, с использованием другого метода экстракции или дополнительной
стадии очистки (возможна контаминация).
Все стадии испытаний иполученные результаты должны быть запротоколированы.
6.3 Выражение отрицательного результата
Отрицательный результат никогда недолжен выражаться как «нуль» или «ГМОотсутствует».
В протоколе испытанийдолжна содержаться следующая фраза: «В анализируемойпробе матери
ал. являющийся производным ГМО. не обнаружен».
и